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    沈先生

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    湖北 武汉市 洪山区

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    试剂、耗材、技术服务、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、抗体

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一步法多重 PCR 试剂盒,分子诊断研发不用愁

2058 人阅读发布时间:2019-10-24 18:12

多重PCR试剂盒

 

多重 PCR(multiplex PCR),又称多重引物 PCR 或复合 PCR,它是在同一 PCR 反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的 PCR 反应。其反应原理,反应试剂和操作过程与一般 PCR 相同,但多重 PCR 和在很多应用中有巨大的优势,深受分子诊断领域研究者与开发者的喜爱:

  1. 高通量 (每个反应孔可分析更多样本,产出显著提高)
  2. 更低的样本用量和试剂用量(特别适合珍稀样品,降低成本)
  3. 更高的实验精度,使加样精度错误最小化


多重 PCR 目前也面临着一些问题:

 

1.PCR 通常需要充分优化退火条件,以便对不同的引物–模板系统实现最高效率的扩增。这种类型的 PCR 经常受到非特异性 PCR 产物的影响。严格的热启动程序和特别优化的缓冲溶液系统对于成功的多重 PCR 绝对是非常关键的。

2.多重 PCR 所面对的另外一个挑战是,不同的引物对之间,杂交动力学性质不同。结合效率更高的引物能更充分的利用 PCR 反应试剂,从而导致其它 PCR 产物的减少。这通常会导致一些本应该被扩增的产物没有出现。有一些商业化的试剂盒经过特别的设计,可以避免这种情况。

 

 Real-time RT-PCR 可以通过一步法或者两步法完成,两者各有优劣。一步法快速的流程,可以迅速的处理多个样本,并且易于实现自动化。操作步骤的减少提高了不同样本结果的可重复性,并且由于减少了操作,降低了样本被污染的风险。

 

为此,我们推荐使用 Solis BioDyne 研发的高灵敏度、高特异性、高稳定性的一步法多重 PCR 试剂盒-(基于探针),SOLIScript 1-step Multiplex Probe 试剂盒系列产品:

 

名称 货号 兼容的 PCR 仪器 不兼容的 Probe 报告染料
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit 08-55-00250

所有 PCR 仪器;但 Applied

BioSystems™和 Agilent 除外

 
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (ROX) 08-59-00250

Applied

BioSystems™

和 Agilent 的 PCR 仪器

ROX

JUN

Texas Red

SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (Purple) 08-61-00250

Applied BioSystems™ PCR 仪器(需含 Mustang

Purple® 通道)

Cy5

 

SOLIScript™ 1-step Multiplex Probe Kit(一步法多重 PCR 试剂盒-基于探针)可在同一个管子中高特异性的执行 cDNA 合成与基于探针的 qPCR 反应。更多优点如下:

 

一步法多重PCR试剂盒-基于探针

 

  • 卓越的特异性:独家改造的耐热型逆转录酶,cDNA 合成高达 60℃。
  • 多重反应(高通量):一个反应可同时分析 1-4个 靶标。
  • 反应体系配置,无需冰块:专利的蛋白稳定技术,即使室温保存有效期高达 30 天。
  • 无惧高 GC 含量 PCR:独家优化的 buffer 配方。
  • 预防交叉污染:内含 dUTP,可匹配尿嘧啶糖苷酶(UNG)使用。
  • 广泛的设备兼容性:如上表格

 

多重 PCR 试剂盒组分:

 

     1.5x One-step Multiplex Probe Mix

     HOT FIREPol® DNA 聚合酶,反应缓冲液, dNTPs(含dUTP), 15 mM MgCl2 (终浓度为 3 mM MgCl2)

     2.40x One-step SOLIScript Mix

     SOLIScript 逆转录酶, RiboGrip RNase Inhibitor(RNase 强效结合蛋白,抑制 RNA 降解)

     3.Water(无核酸酶)

 

 

 

可靠的实验结果展示:

 

 

multiplex PCR results

 

对提取的人来源的总 RNA 进行 5 个浓度梯度的 10 倍稀释(每个反应:4000pg/ul - 0.4pg/ul),各浓度样品均使用 Solis BioDyne 的一步法多重 PCR 试剂盒,同时分析 4 个靶标。PCR 仪器为:Applied BioSystems™ QuantStudio™ 6 cycler。

 Solis BioDyne的一步法多重PCR试剂盒

多重 PCR,丝毫不影响 PCR 的灵敏度

 

Solis BioDyne的一步法多重PCR试剂盒

Solis BioDyne的一步法多重 PCR 试剂盒性能优于国际知名品牌

 

 除了上述的高端的分子诊断研发神器,Solis BioDyne 为客户提供终点 PCR(end-point PCR),qPCR(real-time PCR),反转录 PCR(Reverse transcription),以及其它 PCR 所需的配套试剂。产品线纵览图如下:

 

Solis BioDyne产品线

 

 Solis BioDyne 来源于欧盟-爱沙尼亚共和国,自 1995 年以来,Solis BioDyne 一直致力于开发和生产高品质的生命科学试剂,现已成为当今欧洲领先的试剂供应商之一。高标准的生产标准和服务使 Solis BioDyne 成为全球值得信赖的优选 PCR 供应商。我们的 DNA 聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes 和其它试剂被全球 110 多个国家的研究者所使用,包括顶级研究机构和生物技术公司。

 

Solis BioDyne 拥有独家的蛋白质稳定技术专利,确保其 PCR 酶与 PCR Mixes 产品具有极高的稳定性,研究者可以常温运输以及常温下配置PCR反应体系(无需冰盒)。即使是室温放置 30 天,其酶活性也没有损耗。

 

作为 Solis BioDyne 在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的 Solis BioDyne 产品以及订制服务。

 

soulis biodyne代理艾美捷科技服务热线

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