Cytoskeleton艾美捷RhoGAP 检测方案

Ras 小 GTP 酶超家族（如 Ras、Rho、Rab、Arf 和 Ran 蛋白）作为二元开关在 GDP 结合的“关闭状态”和 GTP 结合的“开启状态”之间循环，调节下游信号。在细胞中，两种状态之间的循环主要由两种调节蛋白控制：激活的鸟嘌呤核苷酸交换因子 (GEF) 和失活的 GTP 酶激活蛋白 (GAP)。

Ras 超家族的小 G 蛋白通常具有内在的 GTPase 活性，这意味着在它们被 GEF 激活（GTP 结合）后，它们最终会“自行关闭”。然而，内在的 GTPase 速率通常非常缓慢，因此“自动”关闭过程可能需要长达数小时。

由于大多数 Ras 超家族 GTP 酶的内在 GTP 酶活性较慢，因此它们的 GAP 是重要的信号分子，其功能是终止其信号传导。GAP 通过与其靶 G 蛋白的活性、GTP 结合形式结合并J大地刺激 G 蛋白的内在 GTP 酶活性而发挥作用，从而迅速关闭 G 蛋白。

Cytoskeleton 艾美捷 GAP 检测试剂盒可测量因 GTP 依赖 G 蛋白水解为 GDP + P i而产生的无机磷酸盐 (P i ) 的量。该试剂盒包含检测所需的所有试剂，包括 GTP 酶、阳性对照 RhoGAP、精心优化的缓冲液和磷酸盐检测试剂。该测定可以在 96 孔板或 384 孔板中进行。96 孔格式有足够的试剂用于 80 次测定（每种提供的 GTPase 20 次）和 384 孔格式的 160 次测定（每种提供的 GTPase 40 次）

Cytoskeleton 艾美捷该试剂盒包含 Cdc42、Rac1、RhoA 和 Ras 蛋白，但它也可用于任何其他 Ras 超家族 GTPase。

Cytoskeleton 艾美捷RhoGAP 检测试剂盒用途包括：

1.确定未表征的 GAP 的活性和 GTPase 特异性。

2.小 GTP 酶及其相关 GAP 的生化表征。

3.检查不同辅因子或蛋白质结构域对 GAP 活性的调节。

4.筛选 GAP 或 GTPase 的突变蛋白的活性和底物特异性。

5.以 HTS（高通量筛选）形式鉴定 GAP 抑制剂。

Cytoskeleton 艾美捷该示例结果：

测试了添加和不添加 p50RhoGAP 催化结构域的 RhoA 的 GTPase 活性（如下图）。

图： RhoA 蛋白对 GTP 水解测量的 RhoGAP 活性。每个反应包含反应缓冲液 + GTP，并添加单独的 RhoA (RhoA)、单独的 RhoGAP (GAP) 或 RhoA + RhoGAP (RhoA + GAP)。反应在 37°C 下孵育 20 分钟。通过添加 CytoPhos™ 试剂并读取 650 nm 处的吸光度来测量 GTP 水解产生的磷酸盐。

Cytoskeleton相关研究工具：

RhoGEF 交换试验 (BK100)

Rho 抑制剂 I（CT04）

罗丹明鬼笔环肽（PHDR1）

Rho 激活剂 I（CN01）

Cytoskeleton 覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒。艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Cytoskeleton-china-distributor.shtml