GW 590735参数说明及储存注意事项

过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR) α、γ 和 δ 是配体激活的转录因子，在脂质稳态中起关键作用。PPARα 的激活通过降低血浆 ApoCIII 水平和上调 ApoA1（HDL 的主要脂蛋白成分）导致富含甘油三酯 (TG) 的J低密度脂蛋白 (VLDL)的清除增加。艾美捷GW 590735 是一种有效且选择性的 PPARα 激动剂，其表达 GAL4 反应性报告基因的 EC 50值为 4 nM，比PPARγ 和 PPARδ 的选择性高至少 500倍。

艾美捷GW 590735基本参数：

正式名称：2-甲基-2- (4 - ((4-甲基-2- (4- (三氟甲基)苯基)噻唑-5-甲酰胺基)甲基)苯氧基)丙丨酸

CAS 编号：622402-22-6

分子式：C 23 H 21 F 3 N 2 O 4 S

配方重量：478.5

纯度：≥98%

溶解度：DMF：30毫克/毫升

二甲基亚砜：30毫克/毫升

乙醇：30 毫克/毫升

PBS（pH 7.2）：0.25 毫克/毫升

λ最大值：224、311 纳米

艾美捷GW 590735储存注意事项：

对于长期储存，建议GW 590735在-20°C下储存。它将稳定至少两年。GW 590735以结晶固体的形式提供。储备溶液可通过将GW 59035溶解在用惰性气体净化的有机溶剂中来使用。GW 59035可溶于乙醇、二甲基亚砜和二甲基甲烷等有机溶剂。

在进行生物实验之前，应将储备溶液进一步稀释到水缓冲液或等渗盐水中。确保有机溶剂的残留量微不足道，因为有机溶剂在低浓度下可能有生理作用。GW 590735的有机无溶剂水溶液可通过将结晶化合物直接溶解在水缓冲液中来制备。GW 590735在PBS（pH 7.2）中的溶解度约为0.25 mg/ml。我们不建议将水溶液储存超过一天。

过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR） 是配体激活的转录因子，在脂质稳态中发挥关键作用。PPAR激活 结果通过降低血浆ApoCIII水平和上调高密度脂蛋白（HDL）的主要脂蛋白成分ApoA1，增加富含甘油三酯（TG）的J低密度脂蛋白（VLDL）的清除率。1 GW 590735是PPAR的有效和选择性激动剂a 对于GAL4反应报告基因的表达，EC50值为4 nM，与PPAR相比，选择性至少为500倍。

来源：https://www.amyjet.com/products/10009880-5.shtml

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鬼笔环肽-iFluor 594偶联物的功能和应用

这种红色荧光鬼笔环肽偶联物（相当于 Alexa Fluor® 594 标记的鬼笔环肽）选择性地结合 F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用，鬼笔环肽衍生物是用于标记、鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片、细胞培养或无细胞实验中的 F-肌动蛋白的便捷探针。鬼笔环肽与肌动蛋白丝的结合比与肌动蛋白单体更紧密地结合，导致肌动蛋白亚基从丝端解离的速率常数降低，基本上通过防止丝解聚来稳定肌动蛋白丝。此外，发现鬼笔环肽可抑制 F-肌动蛋白的 ATP 水解活性。鬼笔环肽在细胞中的不同浓度下功能不同。当以低浓度引入细胞质时，鬼笔环肽将细胞质肌动蛋白的聚合程度较低的形式以及细丝蛋白募集到聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”中，但它不会干扰应力纤维，即微丝的粗束。

鬼笔环肽的特性是研究 F-肌动蛋白在细胞中分布的有用工具，方法是用荧光类似物标记鬼笔环肽并使用它们对肌动蛋白丝进行染色以进行光学显微镜检查。鬼笔环肽的荧光衍生物已被证明在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及在体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率肌动蛋白网络研究的重要工具。

准备工作解决方案：

艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594偶联物工作溶液

将 1 µL 艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594 偶联溶液加入 1 mL 含 1% BSA 的 PBS。

注意：鬼笔环肽结合物的储备溶液应分装并储存在-20°C。避光。

注意：不同的细胞类型可能会有不同的染色。应相应地制备鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度。

艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594偶联物示例实验：

染色细胞

1.进行甲醛固定。将细胞与 PBS 中的 3.0–4.0% 甲醛在室温下孵育 10–30 分钟。

注意：避免使用任何含有甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.在 PBS 中冲洗固定细胞 2-3 次。

3.可选：将 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定细胞中 3 到 5 分钟以增加渗透性。在 PBS 中冲洗细胞 2-3 次。

4.将 100 μL/孔（96 孔板）的 Phalloidin-iFluor™ 594 Conjugate 工作溶液加入固定的细胞中，并在室温下染色细胞 20 至 90 分钟。

5.用 PBS 轻轻冲洗细胞 2 到 3 次以去除多余的鬼笔环肽结合物，然后用 TRITC 或德州红滤光片组在显微镜下进行电镀、密封和成像。

图：用 4% 甲醛固定的 HeLa 细胞的荧光图像，然后用 Cell Navigator™ F-Actin Labeling Kit *Red Fluorescence* 在 Costar 黑色 96 孔板中染色。细胞分别用 艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594（Cat#23122，红色）和细胞核染料 DAPI（Cat#17507，蓝色）标记。细胞内质网 (ER) 在固定前用 ER Green™（Cat#22635，绿色）染色。

来源：https://www.amyjet.com/products/10009880-5.shtml