Worthington核酸酶、微球菌相关研究及测定方案

艾美捷Worthington核酸酶、微球菌背景：

微球菌核酸酶催化 DNA 和 RNA 的切割以产生 3'-核苷酸。它具有外切和内切 5'-磷酸二酯酶活性。该酶在富含腺苷酸或尿苷酸和脱氧腺苷酸或胸苷酸的位点催化 RNA 和 DNA 的优先内切水解。该酶的分子量为 16,807 道尔顿，并且依赖于钙。最佳 pH 值为 9.2，但会根据存在的离子钙浓度而变化。

单位定义：一个单位对应于在 37°C、pH 8.0、260 nm 处光密度变化 1.0，使用 DNA 作为底物。

艾美捷Worthington核酸酶、微球菌相关研究：

白蛋白，无核酸酶 (BSANF)

脱氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

E•RASE RNase A/T1 Blend (RCT)

组蛋白 (H, NHL)

溶菌酶 (LY/LYSF)

核酸酶，S1 ( SINUC/SINUCL)

核酸、DNA、大肠杆菌、λ/片段、RNA

磷酸酶、碱性 (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)

磷酸二酯酶 I (VPH)

磷酸二酯酶 II (SPH)

蛋白酶 K (PROK/PROKS)

反向转录酶，重组 HIV (RTHIV)

核糖核酸酶 A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)

核糖核酸酶 T1，无动物源 (RT1S)

艾美捷Worthington核酸酶、微球菌测定：

方法：基本上是 Heins等人所描述的。(1966) 基于核酸酶消化 DNA 后酸溶性寡核苷酸的释放。一个单位对应于在 37°C 和 pH 8.0 在指定条件下在 260 nm 处的 1.0 光密度变化。

试剂：

0.1 M 硼丨酸钠，pH 8.8

0.01 M 氯化钙

DNA，2.5 mg/ml：将 25 mg Worthington 小牛胸腺 DNA 溶解在 10 ml 0.01 M NaCl 中制备。在室温下静置过夜，然后缓慢搅拌以产生溶液。

7% 高氯酸

0.1% 牛血清白蛋白

酶：

以 1 mg/ml 溶解在试剂级水中。在 0.1% 白蛋白中稀释至 0.001-0.002 mg/ml 用于测定。

方程

程序：

如下移液器进入 5 个编号的试管中的每一个：

0.1 M 硼丨酸钠，pH 8.8 0.1 毫升

0.01 M CaCl 2 0.05 毫升

0.25% DNA 0.1 毫升

在 37°C 水浴中孵育 6-7 分钟以达到温度平衡。在 0.001-0.0002 mg/ml 范围内制备至少四种不同的酶稀释液。每隔一段时间，将 0.1 ml 适当稀释液移入相应的试管中，并在水浴中更换。向作为空白的第五个添加 0.1 ml 0.1% 白蛋白。孵育 30 分钟。通过添加 0.5 ml 7% 高氯酸以定时间隔停止反应。将试管置于冰浴中 10 分钟，然后加入 2.7 ml 试剂级水。在临床离心机上以最高速度离心 15 分钟。抽出上清液并读取 A 260与空白对照。

注意：为获得最佳结果，应稀释样品以使最终 A 260介于 0.2-0.9 之间。

Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究，诊断，生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶，蛋白质，核酸和试剂盒。艾美捷科技是Worthington的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml