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Worthington细胞分离技术丨基本原代细胞分离方法和材料

213 人阅读发布时间:2022-07-29 14:37

艾美捷Worthington方法和材料:基本原代细胞分离

1.对于非灌注,用无菌剪刀或手术刀将分离的组织切碎或切成 2-4 毫米的块。

2.将组织块加入适当的缓冲液或冰上的平衡盐溶液中,洗涤 2-3 次。

3.加入适量的酶并在最佳温度(通常为 37°C)下孵育适当的时间,间歇混合。

4.通过移液(研磨)轻轻分散细胞。

5.通过细网过滤细胞悬浮液。

6.让细胞沉淀并倒出含有酶的多余液体。洗涤并重复2-3次。

7.在适当的培养基或缓冲液中重悬细胞。

8.定量细胞产量和活力。

9.如果需要,用于培养的种子细胞。

 

灌注程序需要特殊的设备和技术来循环缓冲液、培养基和酶。请参阅参考文本以获取更多信息和指导。

 新闻图片1

 

艾美捷Worthington方法和材料:研磨:(通过温和的泵送作用分散细胞)

这可能是一个至关重要的过程。它用于在解离混合物中孵育后分解组织碎片。如果做得太猛烈,细胞会被破坏,降低活力;太弱,组织碎片将保持完整,从而降低产量。使用 10 ml 移液器轻轻研磨,以每秒约 3.0 ml 的速度填充和排空桶。您可以通过反复试验确定最适合您的组织的速率。避免使细胞悬液起泡。

 

注:Worthington 的组织解离酶可互换用于所引用的大多数制剂。

 

Worthington核心酶:包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。

 

Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究,诊断,生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。艾美捷科技是Worthington的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源:https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml

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