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441 人阅读发布时间:2022-08-18 13:39
骆驼科单域抗体(SdAb),也被称为VHH和纳米抗体,是由骆驼科纯重链抗体衍生出来的重组可变域。 这种结构赋予了一些特色的特性。 SdAb的小尺寸和高稳定性使它成为一种有希望的疾病诊断和治疗工具。SdAb可以更容易地穿透组织,瞄准隐藏在蛋白质结构中的困难表位。 而且,SdAb在许多宿主系统中表达良好,大规模生产也很有成本效益。
通过使用先进的天真驼科动物VHH文库筛选技术,Abnova对文库进行筛选并分离出所需抗原的SdAb克隆。对阳性克隆进行测序并通过ELISA进行验证。 然后,被选中的克隆将被引入HEK293表达载体或大肠杆菌表达载体,用于瞬时和可扩展的SdAb生产,用于许多下游应用。
艾美捷Abnova 骆驼科动物VHH库的筛选工作流程:
·从原始骆驼科动物 VHH 库中分离的 SdAb 克隆
·文库规模: 1.2 x 1012
·要求的筛选抗原量:600μg
·准备时间:8-10周
·交付成果:
1. 通过噬菌体ELISA数据进行噬菌体验证
2. 多达5个不同的VHH序列
3. 多达5个纯化的SdAbs
艾美捷Abnova Camelid SdAb 的优势:
·高亲和力的小尺寸抗体: : 12-15kD左右的小尺寸,具有高亲和力和特异性
·高稳定性: 在广泛的温度范围和J端的pH值下都很稳定
·增强的组织穿透性: 由于其体积小,比IgG有更好的组织渗透性
·小药物特性: 在较苛刻的条件下(热、pH值)识别隐藏的抗原点
·有效的制造: 在各种平台上表达良好,以高浓度配制,易于扩大规模
·动物保护: 无需动物免疫
·高多样性的文库: 原始 VHH 库大小为 1.2 x 1012
骆驼科动物SdAb的生产与传统的Mab和Pab对比:
Camelid SdAb 单克隆抗体 多克隆抗体
大小 12 - 15 kD 大约 150 kD 大约 150 kD
免疫 不需动物免疫 需要进行动物免疫 需要进行动物免疫
所需的抗原数量 ≦1 mg ≦4 mg ≦4 mg
方法 Naïve camelid VHH文库筛选 杂交瘤技术 收获于抗血清中
稳定性 对热、pH值和变性剂有很高的稳定性 热不稳定性 生物学的不稳定性
批间一致性 非常高 高 低
交付时间 8-10 周 16-24 周 4-12 周
艾美捷Abnova 骆驼科单域抗体实例介绍:
图1:VHH克隆分离的ELISA结果
经过6轮淘洗,选定的噬菌体克隆的ELISA结果
图2:所选克隆作为重组抗CD8双价VHH hIgG1 LALAPG抗体的ELISA结果
重组抗CD8双价VHH hIgG1 LALAPG抗体的ELISA质量控制
Abnova现有抗体数量100000多种,蛋白近25000多种,其通过基因组学手段生产出的几万种重组蛋白和抗体,J大的扩展了生物试剂应用的视野和多样性。艾美捷科技是Abnova的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/abnova-china-distributor.shtml
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