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137 人阅读发布时间:2022-08-25 14:49
关于艾美捷worthington细胞分离优化技术,主要包含一般准则、优化策略和细胞定量、生存能力测量这四个方面。那么接下来一起看看一般准则的详细攻略吧~
艾美捷worthington优化技术:一般指南
尽管针对特定细胞类型的细胞分离程序的优化取决于具有各种所需特性的细胞的充分回收,但可以建立一些指导方针。本指南中有关细胞分离和所用酶的信息,结合逻辑和适当的实验设计,应能开发出令人满意的细胞分离方法。(有关详细讨论,请参见 Freshney 1987。)
图1:细胞产量和活力之间的复杂关系可以通过左侧显示的简化图示来表示。一般来说,在产量和生存力之间存在平衡的优化回收区域;在该范围的中间附近工作将减少细胞分离过程结果的可变性。了解这种关系以及它如何随特定细胞类型和应用而变化,可以使优化过程更容易。
图2:出于故障排除的目的,艾美捷worthington列出了各种可能的结果以及建议的纠正措施。请记住,象限之间没有明确的界限,而是具有可变重叠区域的会聚区域。
1.低产量/低活力:过度/欠解离,细胞损伤。改用较少消化的酶和/或降低工作浓度。(例如从胰蛋白酶到胶原酶/从 2 型胶原酶到 1 型)。
2.低产量/高活力:解体下。增加酶浓度和/或孵育时间并监测产量和活力反应。如果产量仍然很低,请评估更易消化的酶和/或添加辅助酶。
3.高产量/低活力:解离性好,细胞损伤。酶过度消化和/或工作浓度过高。减少浓度和/或孵育时间并监测产量和活力响应。
尝试通过添加牛血清白蛋白 (BSA) (0.1 - 0.5% w/v) 或大豆胰蛋白酶抑制剂 (0.01 - 0.1% w/v) 来稀释蛋白水解作用。尝试使用较少的蛋白水解酶,尽管产量可能会受到影响并应进行监测。
4.高产量/高活力:考虑评估解离参数的影响,以了解它们的局限性以供将来参考。
Worthington专注于高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。其核心酶产品包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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