Jackson Western印迹检测分析物丨比色免疫印迹

前言：

比色检测是一种经济、简便的Western印迹检测分析物的方法。与二抗偶联的酶报告基因与显色底物发生反应，产生视觉上可检测的信号，从而直接在印迹膜上识别目的蛋白的存在。

这期的主题是Jackson ImmunoResearch公司为大家讲解：Western Blot、IHC 和 ELISA 的显色检测。

具有比色检测的蛋白质印迹使用与酶报告分子偶联的二抗，该酶报告分子催化可溶性显色底物转化为有色不溶性产物。该产物沉淀在印迹膜上，产生肉眼可见的彩色条带，从而识别出感兴趣的蛋白质。

Jackson公司比色信号检测是一种用于一般实验室的有用方法，设置成本低，因为不需要特殊设备来可视化信号。

图 1：间接比色检测。A. 酶联二抗与目的蛋白的一抗结合。B. 将底物添加到抗体-抗原复合物中。C. 酶与底物反应，形成可检测的有色产物。

一、Jackson公司：开发印迹很简单

将膜与显色底物一起温育，直到产生所需水平的信号，然后简单地将底物洗掉。这会停止酶促反应并阻止印迹进一步发展。比色检测操作简单快捷，与化学发光或荧光系统相比，为优化提供了更大的灵活性。然而，固定的沉淀物不利于膜的剥离和重新探测，使得使用额外抗体的多次探测不可靠。

比色 Western blotting 可以具有高灵敏度，但长时间孵育会导致背景信号增加，这可能会掩盖来自感兴趣蛋白质的信号。因此，比色检测可能不适用于低丰度蛋白质。然而，当已知蛋白质丰富或方法已优化时，简单性和低成本使得比色检测具有吸引力。有多种底物可用，它们会产生一系列有色沉淀物，每种都提供不同的灵敏度。

图 2：比色西方印迹。通过 SDS-PAGE 分离还原的和 SDS 变性的小鼠 IgG 的重链 (HC 50 kDa) 和轻链 (LC 25 kDa)，并使用过氧化物酶-山羊抗小鼠 IgG (H+L) 在蛋白质印迹上检测并用 TMB 可视化显色底物。

Jackson公司专注于亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白研究，服务领域覆盖各大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。艾美捷科技是Jackson公司的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml