Jackson艾美捷Fab抗Fc片段二级抗体及使用FabuLight的技术提示

Jackson艾美捷FabuLight抗体是特异于IgG或IgM一级抗体Fc区的Fab片段二级抗体。

它们与9种不同的荧光团和生物素结合，能够在与细胞或组织孵育之前标记一级抗体。这为顺序孵育流式细胞术和免疫组织化学程序提供了一种省时的替代方法，而不会损害一级抗体的活性部位。

Jackson艾美捷FabuLights可用于标记融合蛋白或细胞表面免疫球蛋白的Fc结构域，而无需交联或激活细胞。FabuLights不会交叉吸附其他物种，因此可能需要阻断步骤，以避免标记内源性免疫球蛋白。

通过减少培养和清洗步骤，节省时间并保存细胞

用FabuLight标记的一级抗体孵育比用一级抗体和标记的二级抗体连续孵育需要更少的洗涤，从而减少流式细胞术协议中对细胞的损伤。需要来自同一宿主动物的多个一级抗体的方案中的孵化步骤也减少了。

对一级抗体活性部位无干扰

FabuLight与一级抗体的Fc部分（抗IgG、Fcγ特异性或抗IgM、μ链特异性）结合，使抗原结合区保持活性。

无沉淀或聚集

产生的一级抗体与FabuLight的复合物不会沉淀或聚集，因为染料偶联的Fab抗Fc二级抗体片段是单价的。FabuLight一级抗体复合物具有良好的组织渗透性和较低的非特异性结合。

使用Jackson艾美捷FabuLight的技术提示™

FabuLight抗体尚未被吸附以消除对其他物种的交叉反应性，因此在应用FabuLiight标记的复合物之前，可能有必要在与未标记的FabuLiht孵育之前阻断内源性IgG。

FabuLight标记的复合物提供的信号不如先与一级抗体进行连续孵育，然后与标记的二级抗体进行孵育。

为了避免FabuLight一级抗体被后续标记的二级抗体取代，可能需要与戊丨二醛轻微交联，前提是它不会影响后续目标蛋白的抗原性。

对于所有多重标记应用，Jackson建议按顺序培养FabuLights，以最小化交叉反应性。

首先标记含量较低的目标抗原，以获得J佳结果。

对于IgG类一级抗体，以3:1摩尔比的FabuLight一级抗体（等重比）络合可提供良好的一级抗体标记，而无需过多的未结合FabuLiight。

对于IgM一级抗体，使用15:1摩尔比的FabuLight一级抗体（等重量比）。

对FabuLight标记的复合物与其目标抗原进行滴定，以最小化游离Fab抗Fc的量，从而最小化多重标记应用中的潜在错误标记。

Jackson ImmunoResearch专注于亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白研究，服务于大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。艾美捷科技是Jackson的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml