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艾美捷Cas9 ELISA检测试剂盒的制备和文献参考

122 人阅读发布时间:2022-10-24 15:31

艾美捷 Cas9 ELISA检测试剂盒试剂的制备:

- 1X 洗涤缓冲液。用去离子水将10倍的洗涤缓冲液稀释到1倍。搅拌至均匀。

- 生物素化的抗Cas9抗体和链霉菌素-酶结合物。在使用前立即将生物素化的抗Cas9抗体和链霉蛋白-酶结合物用1:1000的稀释液稀释。检测稀释液。不要储存稀释后的溶液。

 

艾美捷 Cas9 ELISA检测试剂盒标准曲线的制备:

在0到100纳克/毫升的浓度范围内准备Cas9标准品的稀释系列(图1)。

81.jpg 


图1:Pyogenes Cas9标准的制备 

图2:检测转染的293细胞中的Cas9。用Cas9的哺乳动物表达载体瞬时转染细胞或模拟转染细胞。哺乳动物表达载体或模拟转染。48小时后,用RIPA缓冲液裂解细胞。并测定蛋白浓度。Cas9 ELISA试剂盒在没有细胞裂解液的情况下进行。

在没有细胞裂解液(阴性)、有50纳克/毫升Cas9核酸酶(阳性)(NEB目录号M0386)、有10微克蛋白裂解液(阳性)的情况下进行Cas9酶联免疫吸附试验。存在10µg模拟转染(Mock)或Cas9转染(Cas9)的蛋白裂解液。

 

艾美捷 Cas9 ELISA检测试剂盒相关文献:

1. Heler, R; Samai, P; Modell, J. W.; Weiner, C; Goldberg, G. W.; Bikard, D; Marraffini, L. A.

(2015). Nature. 519 :199–202.

2. Jinek, M.; Chylinski, K.; Fonfara, I.; Hauer, M.; Doudna, J. A.; Charpentier, E. (2012). Science.

337: 816–821.

3. Mali, Prashant; Esvelt, Kevin M; Church, George M (2013). Nature Meth. 10: 957-963.

4. Mali, Prashant; Aach, John; Stranges, P Benjamin; Esvelt, Kevin M; Moosburner, Mark; Kosuri,

Sriram; Yang, Luhan; Church, George M (2013). Nature Biotech. 31: 833-838.

5. Gilbert, Luke A.; Larson, Matthew H.; Morsut, Leonardo; Liu, Zairan; Brar, Gloria A.; Torres,

Sandra E.; Stern-Ginossar, Noam; Brandman, Onn; Whitehead, Evan H.; Doudna, Jennifer A.;

Lim, Wendell A.; Weissman, Jonathan S.; Qi, Lei S. (2013). Cell. 154: 442-451.

6. Zheng Q, Cai X, Tan MH, Schaffert S, Arnold CP, Gong X, Chen C-Z, and Huang S. (2014)

BioTechniques 57:115-124.

 

来源:https://www.amyjet.com/products/PRB-5079.shtml

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