艾美捷T7 RNA聚合酶化学性质&文献参考

噬菌体T7 RNA聚合酶是一种DNA依赖性RNA多聚酶（99kDa），对含有T7噬菌体启动子的DNA序列的体外RNA合成进行催化。高浓缩版T7 RNA聚合酶HC非常适合建立和优化高产量的体外转录反应。所提供的T7 IVT设置缓冲液、MgCl2和DTT溶液能够测试不同的反应条件，例如核苷酸/MgCl2浓度。

艾美捷T7 RNA聚合酶化学性质：

仅供体外使用！

运输：凝胶包装运输

储存条件：-20°C储存

避免冻融循环

保质期：12个月

纯度：≥ 95%（SDS-PAGE）

形式：液体

浓度：2.0–2.2μg/μl（T7 RNA聚合酶HC储存缓冲液中的A280，ɛ=140 l mmol-1 cm-1[1]）

J小优化的分析设置建议：HighYield T7 RNA合成试剂盒（#RNT-101）。

活性：1μl T7 RNA聚合酶HC在37°下10分钟内产生>/=30μg RNA。这相当于1000 U NEB的T7 RNA聚合酶（高浓度），#M0460T（活性测定条件：1x T7 IVT建立缓冲液，补充10 mM DTT、12 mM MgCl2、3 mM NTPs、1μl T7 RNA聚合酶HC和1μg DNA模板（1.4 kpb RNA转录物），20μl。用荧光微板测定法测定RNA产量。）

艾美捷T7 RNA聚合酶包含：

T7 RNA Polymerase HC

1x 50 μl (2 μg/μl)

50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.1 % Triton-X-100, 50 % Glycerol (v/v), pH 8.0

T7 IVT Set-up Buffer

1x 200 μl (10x)

400 mM Tris-HCl (pH 8.0), 20 mM Spermidin

DTT

1x 100 μl (100 mM)

MgCl2

1x 200 μl (200 mM)

艾美捷T7 RNA聚合酶相关研究：

HighYield T7 RNA Synthesis Kit, #RNT-101

RNAse Inhibitor - recombinant, #PCR-392

NTP bundle, #NU-1014

文献参考：

[1] King et al. (1986) Transcription by T7 RNA Polymerase Is Not Zinc-Dependent and Is Abolished on Amidomethylation of Cysteine-347. Biochemistry25(1):37.

来源：https://www.amyjet.com/brand/Enzo-Life-Sciences.shtml