Fluorochrome艾美捷荧光金，耐紫外线，非常灵敏

Fluoro-Gold can be visualized with a fluorescence microscope using a wide band ultraviolet excitation filter. A gold color is emitted when tissue has been processed with neutral pH buffer, whereas a blue color is emitted when tissue is processed with acidic (e.g. pH 3.3) pH buffer. It can be photographed digitally or with film (use Ektachrome 200-400 ASA film for color prints and comparable speed film for black and white prints, for example Tri-X). Most exposure times range from 10-60 second exposures, depending on the objective magnification and the intensity of the label. Thirty (30) second exposures are about average. Multiple exposures may be exploited to simultaneously visualize Fluoro-Gold and another tracer. Thus, UV would be combined with bright field illumination to simultaneously locate Fluoro-Gold with HRP or silver grains in autoradiography. Similarly, blue light excitation can be combined to also visualize the green emission color of FITC, while green excitation light may be used to simultaneously observe the red emission color of propidium iodide, or ethidium bromide (a fluorescent counterstain).

艾美捷Fluorochrome荧光金（FC10000）在紫外线激发下发金黄色光，特点是非常灵敏，不仅能标记胞浆，而且能很好地显示树突分枝，但核和核仁不染色；在胞体内分解慢，甚至在注射后存活2月标记强度仍无明显变化；比较耐紫外线的照射，褪色比较慢；可以经受许多组织学染色处理。

荧光金被用作逆行轴突示踪剂，尽管确实发生了正向轴突运输。存活时间应变化（特别是12小时-2天的极短存活时间），以最大限度地提高所研究的特定神经元系统中的正迁移。对于逆行运输，存活时间应从4天到14天不等。大多数系统需要7到10天的时间，尽管长路径（如脊髓到脑干）和大型哺乳动物（如猫、猴子）的路径可能需要更长的生存时间（如14天）。此外，由于荧光金在逆行标记的神经元中保持快速，几个月的存活时间也将产生极好的结果。对于离子电渗疗法，建议2-5天的存活时间。据估计，哺乳动物每天的运输量约为2厘米；对于冷血动物来说，速度较慢。

荧光金的使用与其他荧光示踪剂基本相同。主要区别在于Fluoro Gold在注射后存活时间、浓度范围、组织治疗以及与其他组织化学技术的兼容性方面更为灵活。

储存和保质期：干燥的荧光金应保存在4摄氏度的不透光封闭容器中。正确储存，Fluoro Gold的保质期应超过一年。溶液中的染料也应保存在4摄氏度的不透光封闭容器中，在这种情况下，它将保持稳定至少六个月。

Vehicle：氟金可溶解在蒸馏水或0.9%盐水中，或用作0.2M中性磷酸盐缓冲液中的悬浮液。

染料浓度：氟金已在1-10%的浓度范围内成功使用。最初，建议浓度为4%。如果注射部位出现不希望的坏死，或标记过于强烈，则将浓度降低至2%溶液。如果需要使用更精确的测量，氟金的分子量为532.6道尔顿。

Fluorochrome荧光金（FC10000）组织化学处理：

含氟金的组织可根据几乎任何常见的组织学技术进行处理。这包括未固定组织的冷冻切片（10µm）、固定组织的冰冻切片（20µm）和从塑料（2-4µm）或石蜡（3-10µm）中嵌入的组织切下的薄片。固定组织的冰冻切片是最常用的。

检查和摄影

荧光金可以使用宽带紫外激发滤光片在荧光显微镜下观察。当用中性pH缓冲液处理组织时发出金色，而当用酸性（例如pH 3.3）pH缓冲液加工组织时发出蓝色。它可以用数码或胶片拍摄（彩色打印使用Ektachrome 200-400 ASA胶片，黑白打印使用同等速度的胶片，例如Tri-X）。大多数曝光时间范围为10-60秒，取决于物镜放大率和标签强度。三十（30）秒曝光约为平均值。可以利用多次曝光同时可视化荧光金和另一种示踪剂。因此，UV将与亮场照射相结合，以在放射自显影中同时定位荧光金与HRP或银颗粒。类似地，蓝光激发可以组合起来，也可以可视化FITC的绿色发射颜色，而绿色激发光可以用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭（荧光复染剂）的红色发射颜色。

Fluorochrome荧光金（FC10000）其他信息：

对于通过微量注射器或微量移液管进行的压力注射，Fluoro Gold应溶解在蒸馏水中或0.9%盐水中。氟金也可用作2M中性磷酸盐缓冲液中的悬浮液，然而，悬浮颗粒可能会堵塞细的微量移液管尖端，因此蒸馏水或0.9%盐水是首丨选载体。对于离子电渗疗法，1%的氟金溶液在1M乙酸缓冲液（pH=3.3）中配制。清洁良好（95%ETOH，水）的玻璃微量移液管尖端应为10-20µm。最佳的离子电渗参数是在10-20分钟内用脉冲电流（4-10秒开启，4-10秒关闭）输送+1至+5u安培。

实际上，任何中枢或外周神经系统结构都可以注射Fluoro Gold进行逆行转运分析。在外周神经系统中，可以研究神经节和外周目标。对于周围神经的研究，应切断或损伤神经，并浸入或注射aq。5%氟金溶液。由于Fluoro Gold不会被完整的通过纤维显著吸收，因此纤维必须被切割或严重损坏才能吸收染料。

来源：https://www.amyjet.com/products/FC10000.shtml