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669 人阅读发布时间:2023-05-24 16:35
抗凝血酶III的结构域结构 抗凝血酶III
包含三个链内二硫键(-S-S-),一个富含碳水化合物的结构域(CHO),一个NH2末端肝素结合结构域和一个COOH末端丝氨酸蛋白酶结合结构域。

抗凝血酶III(ATIII)是一种单链糖蛋白,分子量为58,000。它是serpin(丝氨酸蛋白酶抑制剂)超级家族的成员,被认为是凝血级联反应中最重要的抑制剂(1,2)。ATIII抑制广泛的丝氨酸蛋白酶,包括凝血酶,因子IXa,Xa和XIa,激肽释放酶,纤溶酶,尿激酶,C1-酯酶和胰蛋白酶。抑制机制涉及在蛋白酶的活性位点和ATIII的剪断键(Arg 1-Ser 1)之间形成稳定的385:386复合物。凝血酶的活性位点丝氨酸已被证明与ATIII的P1氨基酸(Arg 385)形成共价中间体。ATIII抑制丝氨酸蛋白酶的速率通过肝素不同程度地增加。在作为凝血酶抑制剂或Xa因子抑制剂的情况下,在肝素存在下与ATIII的相互作用增强3个数量级。ATIII和肝素之间的相互作用涉及肝素上硫酸化和非硫酸化单糖单元的独特序列,以及ATIII上的关键赖氨酸残基。ATIII与血管内皮上的类肝素结构的结合已被证明并显示可增强因子IXa,Xa和凝血酶的抑制。
ATIII也可能在补体级联中起作用。已经证明了ATIII与血清中液相补体攻击复合物的结合。此外,补体的S蛋白(膜攻击复合物的抑制剂)干扰ATIII/凝血酶相互作用。
ATIII由新鲜冷冻血浆通过肝素-琼脂糖亲和色谱法制备(3)。纯化的蛋白质以50%(体积/体积)甘油/H 2 O形式提供,应储存在-20°C。 纯度通过SDS-PAGE分析确定。
Prolytix(Haematologic Technologies)样品凝胶信息:
凝胶 Novex 4-12% 双三
负荷 人 ATIII,每泳道 1 μg
缓冲区 拖把
标准 见蓝加2;肌球蛋白 (191 kDa)、磷酸化酶 B (97 kDa)、BSA (64 kDa)、谷氨酸脱氢酶 (51 kDa)、醇脱氢酶 (39 kDa)、碳丨酸丨酐酶 (28 kDa)、肌红蛋白红 (19 kDa)、溶菌酶 (14 kDa)
Prolytix(Haematologic Technologies)性能:
地方化 血浆
血浆浓度 150微克/毫升
作用方式 丝氨酸蛋白酶抑制剂
分子量 58,000 (3)
等电点 4.9-5.3 (5)
结构 单链,三链内二硫键(Cys 8-Cys 128,Cys 21-Cys95,Cys 239-Cys 422)(4),10%a-螺旋,30-40%B结构,50%无规线圈(5),断裂键(Arg 385-Ser 386)
碳水化合物百分比 9 % (5,7)
引用文献:
Griffith, M.J., In Blood Coagulation, ed. R.F.P. Zwaal, H.C. Hemker, pp. 259-283, Amersterdam: Elsevier, 1986.
罗森伯格,R.D.等人,J.克林。投资, 74, 1 (1984).
Damus,P.S.和Rosenberg,R.D.,方法酶,45,653-69(1976)。
Petersen, T.E., et al., In The Physiological Inhibitors of Coagulation and Fibrinolysis, ed. D. Collen, M. Verstrate, pp. 43-54, 5.阿姆斯特丹:爱思唯尔,1979年。
Nordenman, B., et al., J. Biochem., 78, 195 (1977)。
Conrad, J., et al., Hestasis, 13, 363 (1983)。
Kurachi, W., et al., Biochemistry, 15, 368 (1976).
Prolytix(前身为Haematologic Technologies,简称haemtech)专注于凝血诊断领域, 主要研究参与凝血调节以及骨代谢的蛋白, 可提供高质量血浆来源的凝血蛋白,以及单克隆抗体和多克隆抗体。此外,还提供凝血因子缺乏血浆和用于临床研究的定制采血管。 艾美捷科技是Prolytix(Haematologic Technologies)的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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