艾美捷抗原修复液：简化 HIER 优化、无毒不易燃

AntiFix™ 通用抗原修复缓冲液专为福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织的热诱导表位修复 (HIER) 而设计。该缓冲液使用专有试剂催化 FFPE 组织中甲醛交联的逆转以恢复抗原反应性。

艾美捷抗原修复液#BTM-22030特征：

在中性 pH 条件下对多种靶标进行出色的抗原修复

简化 HIER 优化

通过使用酪胺扩增的荧光染色进行验证

无毒不易燃

用福尔马林（甲醛）固定组织可以保留组织形态，但甲醛引起的蛋白质交联可以修饰抗体结合位点或表位，因此免疫组织化学无法再检测到它们。传统上，通过使用蛋白酶处理或通过在低 pH 柠檬酸盐缓冲液或高 pH Tris 缓冲液中加热载玻片来恢复表位反应性。不同表位的最佳去掩蔽方法各不相同，需要针对不同靶标使用多种缓冲液。

AntiFix™ 通用抗原修复缓冲液经过精心配制，可在中性 pH 条件下为各种靶标提供出色的热暴露，从而减少对缓冲液优化的需求。它已在使用 HRP 介导的酪胺信号放大的下一代荧光 CF® 染料对 FFPE 组织进行免疫荧光染色时得到验证。

抗原检索方案：

注：FFPE切片应烘焙在带正电的幻灯片上，以避免抗原回收过程中的组织损失

1.使用标准方案对FFPE切片进行除石蜡和再水合。

2.将幻灯片放入Coplin罐子或微波炉保险柜内的幻灯片架中

容器注意：微波会导致玻璃罐破裂。集装箱应在使用前测试耐热性。

3.准备1X AntiFix™ 组合1的通用抗原回收缓冲液体积为10X的缓冲液，含9体积的dH2O并完全混合。

4.添加足够的1X AntiFix™ 缓冲液以完全覆盖组织切片。通常，缓冲区被添加到磨砂幻灯片标签的级别。典型的5载玻片的Coplin玻璃罐的体积为40 mL，24载玻片的体积为200 mL架子染色皿。

5.加热缓冲区中的幻灯片。使用微波的两种加热方法（a）或下面描述多功能炊具（b）。微波是一种由来已久的技术HIER方法。一种带数字温度控制的厨房多功能锅（例如，Instant Pot®）是微波炉的一种方便的替代品。其他加热HIER常用的方法（如热水浴或商业倾斜室）。

注：用于纸巾加工的厨房设备应为专用设备用于研究实验室，根据您的要求贴上生物危害标签机构或地方法规。

a） 使用微波炉：保持载玻片容器未覆盖或松散覆盖以避免压力积聚。用微波炉加热幻灯片，直到缓冲液沸腾了。持续监控集装箱，继续煮10分钟，根据需要每30-60秒停止一次微波炉以防止缓冲液沸腾。煮沸10分钟后，让容器冷却至室温。

b） 使用多功能锅：放置随锅里的炊具。将滑动容器盖松以避免压力积聚。将滑动容器放在支架上，确保其固定安全地避免倾倒。把锅里装满水，使水位达到一半向上滑动容器。关上锅盖，在98°C下加热45分钟没有压力。热处理完成后，小心地移除将容器从锅中的热水中取出，冷却至室温温度

6.用dH2冲洗载玻片3次O完全移除缓冲区。

7.根据您的方案进行染色。

抗原修复液相关研究：

来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22030-50mL.shtml