皮质醇ELISA试剂盒Cortisol ELISA Kit 操作流程

皮质醇ELISA试剂盒性能：

中文名称：皮质醇ELISA试剂盒

英文名称：Cortisol ELISA Kit

检测范围：0.375nmol/L~12nmol/L。

灵敏度：0.1。

特异性：仅用于科研不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

艾美捷皮质醇ELISA试剂盒#K003-H1操作流程如下：

（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。

（2）酶标板置4℃，包被过夜。

（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准产品仅用于科研。

皮质醇ELISA试剂盒组成：

1：预包被板: 96T/48T

2：酶标记抗体: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1

3：标准品: -6 0.5mL x 2

4：EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1

5：标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1

6：显色剂: TMB底物液 15mL x 1

7：终止液: 1N硫酸 12mL x 1

8：浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1

来源：https://www.amyjet.com/products/K003-H1.shtml