超级纯钙黄绿素,AM：：席卷而来的超值优惠

钙黄绿素是一种亮绿色的荧光团，在结合细胞内游离钙离子时具有增强的荧光。相比之下，其AM酯衍生物没有荧光，带中性电荷。这两个特性对于钙黄绿素AM作为活细胞的特异性染色至关重要。首先，中性电荷增加了疏水性，使钙黄绿素AM能够穿过活细胞的膜。其次，AM酯掩盖了钙螯合位点，这是荧光所必需的。只有在具有活性细胞内酯酶的活细胞中，AM酯基才会被切割，钙才能结合并发出荧光。此外，转化为亲水性钙黄绿素分子会将其捕获在细胞内，而死细胞则不会保留染料。通过这种方式，钙黄绿素AM专门选择活细胞。

艾美捷超级纯钙黄绿素,AM：

货号：AAT-22003

等级：超纯

分子量：994.86

溶剂：DMSO（二甲基亚砜）

消光系数（cm -1 M -1）：81000

激发（纳米）：501

发射（纳米）：521

H-短语：H303, H313, H333

危险符号：XN

预期用途：仅限研究使用（RUO）

R-短语：R20, R21, R22

储存：冷冻（< -15 °C）；尽量减少光照暴露

激发：488 纳米激光

发射：530, 30 纳米滤光片

仪器规格(S)：FITC通道

激发：490

发射：525

截止：515

推荐板：黑色壁，透明底

仪器规格(S)：底部读取模式

有关超级纯钙黄绿素,AM的FAQ：

荧光素AM在细胞中能持续多久？

被水解的荧光素AM（例如，荧光素）是一种水溶性化合物，可以保留在具有完整细胞膜的活细胞中数小时至数天，具体取决于细胞类型、细胞形态或实验条件。在 Miles 等人于 2016 年进行的基于细胞的实验中，装载了荧光素AM的前列腺癌细胞在 0.5、2、6、12、24 和 36 小时标记处被成像。在 36 小时标记处，细胞仍然适度荧光；然而，背景荧光有所增加。噪声增加的一个原因是有机阴离子转运蛋白（OATs）排出荧光素，它们在调节阴离子平衡中起着关键作用。Probenecid，作为一种 OAT 抑制剂，可以添加到荧光素AM工作溶液中，以改善去酯化荧光素的细胞内保留并减少干扰。

图：用 Calcein UltraGreen™ AM（货号 21905）染色的 HeLa 细胞的荧光图像，在 Costar 黑色壁/透明底 96 孔板中。洗涤后，添加回生长介质，并使用配备 FITC 滤光片的显微镜监测细胞长达 24 小时。

荧光素AM可以固定吗？

简单地说，不，荧光素AM是不可固定的。无论使用哪种固定方法 - 醛类或甲醇固定 - 用荧光素AM染色的细胞都会失去它们的染色模式。此外，荧光素AM不能用于固定细胞，因为它们缺乏将荧光素AM转化为荧光素所需的酯酶以及保留染料所需的膜完整性。荧光素AM是一种荧光原酯酶底物，只能用于活细胞以确定细胞活性。

荧光素AM能染色细菌吗？

荧光素AM染色不仅非常适合真核样本，还可用于确定细菌样本的细胞活性。荧光素AM适合检测许多活的革兰氏阴性细菌菌株，可用于微生物学研究、环境监测、药品无菌性测试和食品及植物评估技术。与真核细胞一样，细菌在其细胞质中含有微生物酯酶，可以裂解荧光素AM的疏水阻断基团，并将它们转化为荧光荧光素。信号可以使用荧光仪器测量，其强度与存在的活细菌数量成正比。

如何制作荧光素溶液？

荧光素及其衍生物荧光素AM通常作为冻干固体供应，必须在加载到细胞中之前在溶液中重悬，通常是 DMSO。要制作荧光素或荧光素AM的库存溶液，请在高质量的无水 DMSO 中重悬染料，使浓度大约为 1 mg/mL。例如，向 50 µg 的荧光素AM中加入 50 µL 的 DMSO 将产生 1 mg/mL 的库存溶液。

对于荧光素AM，需要将库存溶液进一步稀释到水性缓冲液（例如，HBSS）中，然后才能加载到细胞中。作为水性溶液，荧光素AM容易水解，应在一天内使用。

超级纯钙黄绿素,AM文献参考：

Functional evidence that the self-renewal gene NANOG regulates esophageal squamous cancer development

Authors: Li, Deng and Xiang, Xiaocong and Yang, Fei and Xiao, Dongqin and Liu, Kang and Chen, Zhu and Zhang, Ruolan and Feng, Gang

Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Localized functional chemical stimulation of TE 671 cells cultured on nanoporous membrane by calcein and acetylcholine

Authors: Zibek S, Stett A, Koltay P, Hu M, Zengerle R, Nisch W, Stelzle M.

Journal: Biophys J. (2006)

A vaccination and challenge model using calcein marked fish

Authors: Klesius PH, Evans JJ, Shoemaker CA, Pasnik DJ.

Journal: Fish Shellfish Immunol (2006): 20

Novel fluorescence assay using calcein-AM for the determination of human erythrocyte viability and aging

Authors: Bratosin D, Mitrofan L, Palii C, Estaquier J, Montreuil J.

Journal: Cytometry A (2005): 78

Cytotoxic effects of 100 reference compounds on Hep G2 and HeLa cells and of 60 compounds on ECC-1 and CHO cells. I mechanistic assays on ROS, glutathione depletion and calcein uptake

Authors: Schoonen WG, Westerink WM, de Roos JA, Debiton E.

Journal: Toxicol In Vitro (2005): 505