大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒-科研好物不容错过！

Abbexa大鼠补体C3（C3）ELISA试剂盒是一种用于体外定量测量血清、血浆和其他生物液体中大鼠补体C3（C3）浓度的ELISA试剂盒。

艾美捷大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒：

货号：abx256750

靶标：补体C3（C3）  

反应性：大鼠  

已测试应用：ELISA  

推荐稀释度：最终用户应确定最佳稀释度/浓度。  

储存：以4°C运输。收到后，根据试剂盒说明书中的储存说明储存试剂盒。  

有效期：该试剂盒的有效期至少为6个月。根据要求可提供长达12个月的有效期。  

稳定性：试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下，到期日内的损失率小于5%。为尽量减少性能波动，应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个检测过程由同一用户完成。  

检测范围：7.81 ng/ml - 500 ng/ml  

灵敏度：4.69 ng/ml  

标准形式：冻干  

检测方法：比色法  

检测类型：夹心法  

检测数据：定量  

样本类型：血清、血浆和其他生物液体。  

大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒检测原理：

该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。96孔板上预先包被有抗体。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂，并将整个板孵育。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。使用TMB底物定量HRP酶促反应。加入TMB底物后，只有含有足够C3的孔才会产生蓝色产物，加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的C3量成正比。在450 nm波长下用微孔板读数器比色法测量光密度（OD），从而计算出C3的浓度。  

大鼠补体C3(C3)ELISA试剂盒组分：  

- 预包被的96孔微孔板  

- 标准品  

- 标准品稀释缓冲液  

- 洗涤缓冲液  

- 检测试剂A  

- 检测试剂B  

- 稀释液A  

- 稀释液B  

- TMB底物  

- 终止液  

- 板封  

所需但未提供的材料：  

- 37°C培养箱  

- 多通道和单通道移液器及无菌移液器头  

- 喷雾瓶或自动微孔板洗涤器  

- 1.5 ml试管  

- 蒸馏水  

- 吸水滤纸  

- 100 ml和1升量筒  

- 微孔板读数器（波长：450 nm）  

- ELISA振荡器  

试剂准备：  

1）标准品：用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示，用标准品稀释缓冲液进行标准品溶液的系列稀释。  

2）洗涤缓冲液：按照协议中的指示，用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液。  

3）检测试剂准备：计算所需的工作溶液总量。分别用稀释液A和稀释液B将检测试剂A和检测试剂B按1:100稀释。  

检测程序：

1）设置标准品、测试样品和对照孔。  

2）将100 µl稀释后的标准品加入标准品孔中。  

3）将100 µl标准品稀释缓冲液加入对照（零）孔中。  

4）将100 µl稀释后的样品加入样品孔中。在37°C下孵育90分钟。  

5）将100 µl检测试剂A加入每个孔中。在37°C下孵育1小时。  

6）洗涤3次。  

7）将100 µl检测试剂B加入每个孔中。在37°C下孵育30分钟。  

8）洗涤5次。  

9）将90 µl TMB底物加入每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。  

10）加入50 µl终止液。  

11）在450 nm处测量OD值。  

结果计算：

对于计算，将每个参考标准品和每个样品的O.D.450重复读数平均，并减去平均对照（零）O.D.450读数。可以将标准曲线绘制为每个参考标准品溶液的相对O.D.450（Y）与每个标准品溶液的相应浓度（X）之间的关系。样品的C3浓度可以从标准曲线中插值计算得出。  

检测精密度：  

批内精密度（同一检测内的精密度）：分别在一块板上测试3个低、中、高浓度水平的补体C3（C3）样品，各测试20次。  

批间精密度（不同检测之间的精密度）：在3块不同的板上测试3个低、中、高浓度水平的补体C3（C3）样品，每块板8个重复。  

CV（%）=（标准差/平均值）× 100  

批内精密度：CV<10%  

批间精密度：CV<10%  

显示大鼠补体C3（C3）标准OD数据的图表