抗RNA聚合酶II磷酸化多克隆抗体现货促销，错过再等一年！

一、产品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的抗RNA聚合酶II磷酸化（Ser2）多克隆抗体（货号：A300-654A）为兔源抗人/小鼠RNA聚合酶II亚基A（POLR2A）C端重复结构域中丝氨酸2磷酸化（Phospho S2）的特异性多克隆抗体。RNA聚合酶II是催化DNA转录为RNA的核心酶复合物，其最大亚基RPB1的C端由高度保守的七肽重复序列（YSPTSPS）串联而成，该区域中Ser2的磷酸化状态与转录延伸、RNA加工及转录偶联修复等关键生物学过程密切相关。本抗体经抗原亲和纯化，适用于免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）及免疫印迹（WB）等多种应用，是研究转录调控机制的可靠工具。

二、详细规格

参数 | 规格

靶标 | RNA聚合酶II磷酸化（S2）

反应种属 | 小鼠、人

应用 | IHC、IP、WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

免疫原 | 围绕丝氨酸2位点的磷酸化合成肽（对应人POLR2A C端重复序列）

抗体类型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 200 ug/ml

储存温度 | 2 - 8 °C

有效期 | 自收货之日起1年

缓冲液 | Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09% 叠氮钠

三、产品制备与质量控制

本抗体采用固相载体固定的磷酸化RNA聚合酶II（S2）特异性表位进行亲和纯化。免疫原为磷酸化合成肽段，其序列对应人RNA聚合酶II（GeneID 5430）C端重复序列（YSPTSPS）中丝氨酸2位点周围的区域。免疫球蛋白浓度通过比尔定律测定，以1 mg/ml IgG在280 nm处吸光度为1.4为基准。

质量保证：每批次抗体均经过严格的功能验证，包括：

Western blot检测人及小鼠细胞裂解液中磷酸化Pol II S2的特异性条带（预测分子量约220 kDa）；

免疫沉淀结合质谱或Western blot验证靶标捕获效率；

免疫组化对福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片的染色效价评估。

四、推荐应用与实验条件

所有Western blot实验建议使用5%脱脂牛奶-TBST作为封闭液和抗体稀释液，一抗孵育条件为4°C过夜。

应用 | 推荐稀释度 / 用量 | 备注

Western Blot (WB) | 1:2000 – 1:10000 | 推荐使用3-8% Tris-醋酸凝胶分离。检测细胞裂解液时，二抗推荐山羊抗兔IgG（H+L）（货号A120-101P）；检测免疫沉淀物时，二抗建议使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，并在封闭液中加入5%正常猪血清（货号S100-020）以降低重链干扰。

Immunoprecipitation (IP) | 6 ug/mg 裂解物 | 每毫克总蛋白使用6 ug抗体。建议与Protein A/G琼脂糖珠或磁珠配合使用。

Immunohistochemistry (IHC) | 1:200 – 1:1000 | 对FFPE组织切片，推荐使用pH 6.0的枸橼酸盐缓冲液进行热诱导抗原修复。

五、储存与稳定性

储存条件：2 - 8°C，切勿冷冻。反复冻融会破坏抗体活性。  

有效期：自收货之日起1年，在指定条件下保存可维持完整效价。  

运输条件：冰袋冷藏运输，收货后请立即存放于2-8°C。  

防腐剂：缓冲液含0.09%叠氮钠，可抑制微生物生长。注意：叠氮钠会干扰某些酶偶联检测（如HRP），若需去除，可通过透析或脱盐柱处理。

六、注意事项

1. 研究用途限制：本产品仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。

2. 安全操作：叠氮钠为有毒化合物，操作时请佩戴手套及护目镜。叠氮钠在金属管道中可能形成爆炸性叠氮化物，废液处理时请用大量水稀释。

3. 特异性验证：建议在使用新批次抗体时，同时设置磷酸酶处理对照（如λ磷酸酶）或使用非磷酸化肽段竞争实验，以确认信号的特异性。

4. 应用优化：对于不同的样本类型（如组织、细胞系）及实验体系，可能需要进一步滴定最佳抗体稀释度。

七、典型实验结果预期

Western Blot：在人HEK293、HeLa或小鼠NIH/3T3细胞裂解液中，可检测到一条约220 kDa的条带；用RNA聚合酶II抑制剂（如DRB或Flavopiridol）处理细胞后，该条带信号显著减弱。

Immunoprecipitation：6 ug/mg裂解物的用量可有效富集磷酸化Pol II，洗脱产物适用于下游Western blot或质谱鉴定。

IHC：在人扁桃体、睾丸或小鼠脑组织FFPE切片中，可见细胞核特异性着色，尤其在活跃转录区域（如生发中心、神经元核）呈现强阳性。

八、相关产品推荐

二抗 | A120-101P | 山羊抗兔IgG（H+L）HRP偶联物

阻断血清 | S100-020 | 正常猪血清，用于IP-Western轻链特异性检测

阳性对照裂解物 | 可单独咨询 | 经PMA或UV处理的人细胞裂解物