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190 人阅读发布时间:2026-04-20 10:25
一、 产品概述
BRD2(含溴结构域蛋白2)是一种核丝裂原激活激酶,在细胞周期调控基因的转录中发挥重要作用。BRD2作为衔接蛋白,将E2F转录因子及染色质重塑因子招募至E2F响应元件,从而调控细胞周期依赖性基因的表达。BRD2属于溴结构域蛋白家族,该家族通过识别乙酰化组蛋白参与表观遗传调控。
本文介绍的由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的兔抗BRD2亲和纯化抗体(货号A302-583A)由美国生产,经抗原亲和纯化,适用于小鼠及人源样本的免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)检测。
二、核心规格参数
参数 | 详细信息
靶标 | BRD2(含溴结构域蛋白2)
反应性 | 小鼠,人
应用 | IHC, IP, WB
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 全IgG
免疫原 | 人BRD2蛋白第700–750位氨基酸区间
同型 | IgG
标记 | 非偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原物种 | 人
浓度 | 200 ug/ml
储存条件 | 2 - 8 °C
保质期 | 收货后1年
缓冲液 | Tris缓冲盐水,含0.1% BSA及0.09%叠d化钠
三、免疫原与识别表位
本抗体采用表位特异性亲和纯化工艺制备。将针对BRD2蛋白的特异性表位固定在固相支持物上,从抗血清中亲和捕获并纯化特异性抗体。
A302-583A所识别的表位位于人BRD2蛋白第675位至第725位氨基酸之间。编号依据NCBI参考序列NP_005095.1(GeneID 6046)。免疫原设计对应第700–750位氨基酸,实际识别表位落于此区间内(675–725)。该区域位于BRD2蛋白的C末端部分,在溴结构域家族中具有较高的序列特异性。
四、浓度测定方法
免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定。标准条件下,1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光度(A280)为1.4。本抗体浓度为200 ug/ml(即0.2 mg/ml),较常见抗体浓度(1 mg/ml)偏低,使用时需注意相应调整体积。
五、应用与实验条件
通用说明
所有免疫印迹实验均采用5%脱脂牛奶-TBST作为封闭液及抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜孵育(推荐4°C)。
推荐稀释比例与用量
应用 | 推荐稀释比例/用量 | 特殊说明
免疫组化(IHC) | 1:100 - 1:500 | 推荐使用pH 6.0枸橼酸盐缓冲液进行抗原修复(FFPE组织切片)
免疫沉淀(IP) | 6 ug/mg 裂解物 | 按抗体质量计算,体积需相应调整
免疫印迹(WB) | 1:2000 - 1:10000 | 建议从1:2000开始梯度预实验
六、二抗选择说明
细胞裂解物免疫印迹:
使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体(货号A120-101P)。该二抗可同时识别兔IgG的重链和轻链。
免疫沉淀产物的免疫印迹:
使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体,并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清(货号S100-020)。免疫沉淀后样本经变性处理会释放抗体的重链(约55 kDa)和轻链(约25 kDa)。若使用常规二抗,这些抗体片段会产生强烈背景。采用轻链特异性二抗可有效降低背景干扰,提高目标蛋白(BRD2分子量约88 kDa)的检测灵敏度。
七、产品使用与储存
储存注意事项
抗体应储存于2 - 8°C,请勿冷冻。反复冻融会导致抗体聚集和活性下降。本抗体缓冲液中含有0.1% BSA作为稳定蛋白,以及0.09%叠d化钠作为防腐剂。
稳定性与保质期
自收货之日起,在推荐的储存条件下保质期为1年。因浓度较低(200 ug/ml),建议分装保存,避免多次开盖导致的污染和蒸发。
八、浓度特别提醒
与其他常见抗体(如1000 ug/ml)相比,本抗体浓度较低。进行免疫沉淀时,推荐用量为6 ug抗体/mg裂解物,即需加入30 ul抗体(按200 ug/ml计算)至1 mg裂解物中。进行免疫印迹时,以1:2000稀释度为例,需将1 ul抗体稀释至2 ml抗体稀释液中。
九、研究背景补充
BRD2是含溴结构域蛋白家族的成员之一,该家族包括BRD2、BRD3、BRD4和BRDT。BRD2在多种组织中广泛表达,在胚胎发育、细胞周期进程及肿瘤发生中具有重要功能。研究表明,BRD2基因多态性与青少年肥胖及代谢综合征相关。此外,BRD2作为转录共激活因子,参与NF-κB介导的炎症反应及MHC II类基因的表达调控。近年来,溴结构域抑制剂(如JQ1)作为抗肿瘤药物进入临床试验,本抗体可用于BRD2靶向药物的药效评估及机制研究。
别名:
BRD2内含子转录本1(BRD2-IT1)、雌性无菌同源相关基因1(FSH)、FSRG1、NAT、O27.1.1、Really interesting new gene 3蛋白(RING3)、RNF3
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