兔抗Cul3抗体亲和纯化现货促销，爆款抗体直降！

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本抗体为兔源多克隆抗体（A301-109A），特异性靶向Cullin 3（Cul3）蛋白的C末端区域（第675至725位氨基酸之间）。Cul3是cullin家族成员之一，作为E3泛素连接酶复合物的骨架蛋白，在有丝分裂过程中发挥关键作用，包括染色体正确排列和胞质分裂完成。该抗体经抗原亲和纯化，未偶联标记，适用于免疫组织化学（IHC）、免疫沉淀（IP）和免疫印迹（WB），且与人、小鼠样本有交叉反应性。以下将从基本参数、免疫原信息、应用条件、储存稳定性及生物学背景等方面进行详细说明。

一、关键规格参数

项目 | 详细内容

靶标 | Cul3 (Cullin 3)

反应种属 | 小鼠、人类

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

抗体形式 | 完整IgG

免疫原 | 对应人Cul3蛋白第675至725位氨基酸之间的表位（参考序列NP_003581.1，GeneID 8452）

亚型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯化方式 | 抗原亲和纯化（使用固定化的Cul3特异性表位）

抗原物种 | 人

浓度 | 1000 µg/mL

缓冲液 | Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液，pH 7~8，含0.09%叠氮钠

储存条件 | 2–8 °C

保质期 | 收货后1年

生产流程 | 亲和纯化后，通过Beer定律测定IgG浓度（1 mg/mL IgG在A280下吸光值为1.4）

> 注：0.09%叠氮钠作为防腐剂，使用HRP标记二抗时需注意其抑制作用。IP洗脱或二抗孵育前建议充分去除叠氮钠。

二、免疫原与特异性

本抗体的表位定位于人Cul3蛋白的C末端区域（第675至725位氨基酸）。通过固相载体上固定的特异性表位进行亲和纯化，确保抗体识别天然及变性的Cul3。经内部验证，该抗体可检测人源和小鼠源Cul3，不与其他cullin家族成员（如Cul1、Cul2、Cul4a、Cul4b、Cul5、Cul7等）发生显著交叉反应。反应性覆盖物种依据免疫原序列同源性预测，实际实验中建议以阳性对照（如HEK293或HeLa细胞裂解液）确认信号。C末端区域的选择有助于避免与BTB接头蛋白的同源区干扰，提升靶向特异性。

三、推荐应用与实验条件

以下稀释度均为起始推荐范围，用户需根据具体实验体系进行优化。

1. 免疫印迹（Western Blot, WB）

稀释度：1:1000 – 1:5000  

封闭液及抗体稀释液：5%脱脂奶粉-TBST（Tris缓冲盐水+0.1% Tween-20）  

孵育条件：一抗4°C孵育过夜（推荐）  

二抗推荐：  

常规细胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG（重链+轻链）抗体，如货号A120-101P。  

免疫沉淀后WB：为避免变性IP产物中重链（~55 kDa）信号干扰，推荐使用抗兔IgG轻链特异性HRP标记二抗，并在封闭液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）以降低背景。  

阳性对照：HEK293、HeLa或小鼠胚胎成纤维细胞裂解液。Cul3分子量约为85–90 kDa，建议使用适当浓度的分离胶（8–10% SDS-PAGE）和PVDF膜（0.45 μm孔径）。

2. 免疫组织化学（IHC）

稀释度：1:500 – 1:2000  

抗原修复：对FFPE（福尔马林固定、石蜡包埋）组织切片，必须使用pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液进行热诱导抗原修复。  

推荐对照：使用兔IgG同型对照作为阴性对照，以阳性组织（如小鼠脾脏、睾丸或多种肿瘤组织）确认染色特异性。  

检测系统：适用于显色法（DAB）或荧光法IHC。

3. 免疫沉淀（IP）

用量：6 µg抗体 / mg总蛋白裂解液

操作建议：  

裂解液推荐使用非变性裂解缓冲液（如NP-40或Triton X-100体系），避免破坏Cul3与其底物及接头蛋白（如BTB蛋白）的相互作用。  

孵育条件：4°C旋转孵育2小时或过夜。  

使用Protein A/G琼脂糖或磁珠捕获免疫复合物。  

洗脱后通过WB检测，务必使用抗兔IgG轻链特异性二抗以避免重链干扰。  

阳性对照：过表达Cul3的细胞裂解液或内源性表达较高的细胞（如HeLa、HEK293）。

> 注：本产品未验证用于ICC-IF或ChIP，用户需自行探索。

四、储存与稳定性

储存温度：2–8°C，严禁冷冻。反复冻融会导致抗体变性、效价下降。  

运输条件：湿冰运输，收货后请立即按上述温度保存。  

分装建议：若需长期使用，建议分装成小份后存放于2–8°C，避免污染。不可稀释后长期储存。  

有效期：自收货之日起1年。过期产品可能信号减弱，建议重新订购。