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已认证公司新闻/正文
5 人阅读发布时间:2026-05-06 14:48
产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的ARA70抗体(货号A302-272A)是一种兔源多克隆抗体,特异性靶向人源雄激素受体相关蛋白70(Androgen Receptor-Associated Protein 70,ARA70),即核受体共激活因子4(NCOA4)。该抗体以全IgG形式提供,浓度为1000 µg/ml,经抗原亲和纯化,未偶联标记物,适用于免疫沉淀(IP)和Western Blot(WB)检测。
免疫原与特异性
本抗体的免疫原对应人源ARA70蛋白第564至614位氨基酸残基之间的区域(接近C末端),参考序列号为NP_005428.1(GeneID 8031)。通过表位特异性亲和纯化工艺,将针对ARA70固定化表位的抗体从抗血清中分离纯化,确保高特异性识别目标抗原。
技术参数
参数 | 详细信息
靶标 | ARA70 (NCOA4,核受体共激活因子4)
反应性 | 人
应用 | 免疫沉淀(IP)、Western Blot(WB)
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 全IgG
免疫原 | 第564位–C末端之间(具体为564-614位)
同型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 人
浓度 | 1000 µg/ml
储存条件 | 2–8 °C
保质期 | 收货后1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠d化钠
浓度测定方法
免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定,其中1 mg/ml IgG在280 nm波长下的吸光度(A280)为1.4。
Western Blot实验方案
推荐稀释度
1:2,000 – 1:10,000
实验条件
封闭及稀释液:5%脱脂牛奶-TBST
一抗孵育:过夜孵育(4°C)
二抗(细胞裂解液WB):山羊抗兔IgG重链和轻链抗体(货号A120-101P)
二抗(免疫沉淀物WB):使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体,并在封闭缓冲液中加入5%正常猪血清(货号S100-020),以消除膜上IgG重链的干扰信号。
免疫沉淀实验方案
推荐用量:6 µg抗体/mg细胞裂解物
靶点背景信息
蛋白功能
ARA70最初是在RET原癌基因的染色体易位中作为融合伙伴被发现的。随后,在酵母双杂交筛选中被鉴定为雄激素受体(AR)的配体依赖性相关因子。除作为AR的共激活因子外,ARA70还被发现能够作为维生素D受体、雌激素受体、PPARα和PPARγ的共激活因子,参与多种核受体信号通路的调控。
ARA70(NCOA4)在细胞中主要参与以下过程:
核受体转录激活:通过与核受体的配体结合域相互作用,增强受体介导的基因转录。
铁代谢调控:ARA70被确认为铁蛋白自噬(ferritinophagy)的关键调节因子,介导铁蛋白(ferritin)的选择性自噬降解,释放细胞内储存的铁离子,维持铁稳态。
DNA损伤修复:近年来研究发现ARA70参与同源重组修复过程。
别称
70 kDa androgen receptor coactivator、70 kDa AR-activator、Androgen receptor coactivator 70 kDa protein、androgen receptor-associated protein of 70 kDa、ARA70、ELE1、NCoA-4、nuclear receptor coactivator 4、PTC3、ret fused、RET-activating gene ELE1、Ret-activating protein ELE1、RFG
产品优势与功能特点
1. 高浓度配方(1000 µg/ml):相比同类产品(通常200 µg/ml),本抗体提供更高的母液浓度,灵活性更强。宽WB稀释范围(1:2,000–1:10,000)允许用户根据目标蛋白丰度进行调节,特别是在检测低表达水平的ARA70时,可降低稀释倍数而不牺牲抗体用量。
2. 双重应用验证:同时适用于免疫沉淀和Western Blot检测,IP推荐用量明确(6 µg/mg裂解物),用户无需自行摸索,可快速建立实验体系。
3. 高特异性亲和纯化:采用针对ARA70第564–614位表位的固相亲和纯化,有效去除非特异性血清成分,降低背景信号,尤其适用于IP富集后的WB检测,提高信噪比。
4. 稳定储存配方:Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液(pH 7–8)维持稳定的酸碱环境,0.09%叠d化钠作为防腐剂。2–8°C下可稳定保存1年,无需冷冻,避免反复冻融导致的抗体聚集和活性下降。
5. IP-WB联用优化设计:本抗体配套提供针对免疫沉淀后Western Blot的二抗选择建议——使用抗兔IgG轻链HRP抗体并添加5%正常猪血清封闭。ARA70分子量约为70 kDa,在IP洗脱液中IgG重链(约55 kDa)可能产生干扰信号,轻链特异性二抗可有效消除这一问题,确保目标条带清晰可辨。
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