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41 人阅读发布时间:2026-05-07 14:03
产品概述
本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源抗鸡IgM重链多克隆抗体(货号:A30-102F),采用固相吸附结合抗原亲和纯化双重工艺制备,以完整IgG形式提供。该抗体经过严格的类特异性筛选,可特异性识别鸡IgM分子的重链恒定区表位,且不识别IgM轻链,适用于对鸡IgM的定性、定量及定位分析。
IgM是家禽免疫应答早期产生的关键免疫球蛋白,在抗感染免疫中发挥第一道防线作用。检测鸡IgM不仅可用于评估疫苗免疫后的早期抗体应答、判断感染进程,还可用于禽类B细胞发育、禽病血清学诊断及禽源生物制品质量控制等研究与应用领域。本抗体特异性识别重链,避免了对轻链的交叉反应,显著提升了检测的类特异性。
核心规格参数
参数 | 具体信息
靶标特异性 | 鸡IgM重链
反应种属 | 鸡
宿主 | 山羊
克隆性 | 多克隆
抗体形式 | 完整IgG
亚型 | IgG
标记物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 鸡
浓度 | 1 mg/ml
储存与稳定性
储存温度:2 8 °C
有效期:自收货之日起1年
缓冲体系:含0.09%叠d化钠的磷酸盐缓冲盐水(PBS)
本品有效期相对较短(1年),建议收到后及时规划使用。叠d化钠作为防腐剂存在,在需要使用HRP或其它酶标记二抗的检测体系中,应注意叠d化钠对过氧化物酶的抑制作用;可通过透析或超滤去除。
推荐应用与稀释度
以下稀释度为推荐起始范围,具体优化需根据样本类型、检测体系及灵敏度要求进行调整:
应用类型 | 推荐稀释度 | 备注
ELISA | 1:1000 1:30,0 00 | 包被板建议使用1:100 1:500
免疫细胞化学(ICC) | 1:200 1:2,000
免疫组织化学(IHC) | 1:200 1:2,000
蛋白质印迹(WB) | 1:1000 1:30,000
特别说明:上述列举的应用并非全部经过生产实验室的具体测试验证。对于未经验证的应用体系(如免疫沉淀、流式细胞术等),使用者应自行完成系统的条件优化和验证实验。
鸡IgM的生物学特点与应用意义
IgM在家禽免疫中的核心功能
鸡的免疫球蛋白分为三类:IgM、IgY(功能上类似于哺乳动物IgG)和IgA。IgM是系统发育上最古老、在个体发育中最早出现的免疫球蛋白。
初次免疫应答的标志物:在抗原初次刺激后,鸡B细胞首先产生IgM抗体,随后发生类别转换产生IgY。因此,检测抗原特异性IgM可区分初次感染与再次感染,也可用于疫苗免疫后早期应答的评价。
高效激活补体:鸡IgM五聚体结构具有10个抗原结合位点,能以高亲合力结合抗原并有效激活补体经典途径,在清除病原体(尤其是细菌和病毒)中发挥关键作用。
B细胞发育与成熟:细胞膜表面IgM(mIgM)是未成熟和成熟B细胞的重要标志物。在鸡的法氏囊发育过程中,B细胞前体经历基因重排后表达mIgM,随后发育为成熟B细胞并迁移至外周淋巴器官。检测mIgM可评估鸡B细胞的分化状态。
抗重链抗体的优势
与识别完整Ig分子(H+L)的抗体不同,本抗体特异性针对IgM重链恒定区,具有以下核心优势:
1. 不识别轻链:避免了因轻链通用性导致的与其他鸡免疫球蛋白类别(IgY、IgA)的交叉反应,检测假阳性风险显著降低。
2. 类特异性更精准:适用于需要明确区分IgM与IgY的研究场景(如类别转换研究、亚类应答谱分析)。
3. WB条带更单一:还原条件下仅显示重链条带,不会出现约25 kDa的轻链非特异性信号。
应用场景建议
研究领域 | 应用方式 | 目的
疫苗免疫评价 | 抗原特异性IgM ELISA | 检测免疫后早期IgM应答,评估初次免疫效果
禽病血清学 | 间接ELISA检测总IgM或特异性IgM | 诊断急性感染(如禽流感、新城疫、传染性法氏囊病)
B细胞发育研究 | IHC/ICC检测组织或细胞中的mIgM | 定位B细胞在法氏囊、脾脏等组织中的分布和数量
类别转换研究 | 单细胞水平共检测IgM与IgY | 分析B细胞类别转换效率及调控机制
禽源单克隆抗体开发 | ELISA筛选融合瘤上清中的IgM亚类 | 区分产生IgM还是IgY的单克隆抗体
常见问题与解决方案
问题 | 可能原因 | 建议措施
ELISA中出现与IgY的交叉反应 | 固相吸附不完全或二抗交叉识别 | 降低一抗浓度,更换二抗为抗山羊IgG(已吸附鸡IgY)
WB出现约25 kDa条带 | 可能存在轻链残留反应(非预期) | 确认抗体是否为抗重链特异性;减少上样量或提高一抗稀释度
IHC背景高 | 内源性Fc受体结合或组织内源性IgM非特异性染色 | 封闭步骤使用10%正常山羊血清+5% BSA;增加洗涤次数和洗涤时间
鸡血清样本稀释倍数难确定 | IgM含量较高(成年鸡血清约1-2 mg/ml) | 建议从1:5,000开始梯度稀释,根据信号强度调整
抗体有效期短 | 产品设计为1年稳定期 | 收到后及时使用,避免超期;严格按照2-8°C储存,切勿冷冻
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