兔抗ATM抗体亲和纯化，别等货期，现货促销中

产品概述

本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的针对ATM（ataxia telangiectasia mutated）蛋白的兔多克隆抗体，货号A300-299A。该抗体特异性识别人源ATM，适用于免疫组织化学（IHC）、免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB）检测。抗体经抗原亲和纯化，浓度为1000 µg/ml，为DNA损伤应答机制研究提供了高灵敏度、高特异性的检测工具。

核心规格参数

项目 | 详细信息

靶点 | ATM

反应性 | 人

应用 | IHC, IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第2550-2600位氨基酸区域

亚型 | IgG

偶联物 | 非偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原物种 | 人

浓度 | 1000 µg/ml

保存条件 | 2-8 °C

有效期 | 收货之日起1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠d化钠

应用方法与推荐稀释度

蛋白质印迹（WB）

所有WB实验使用含5%脱脂牛奶的TBST作为封闭液及抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜孵育。

细胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）作为二抗。

免疫沉淀产物WB：使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭液中需添加5%正常猪血清（货号S100-020）以降低轻链非特异性信号。

推荐稀释度：1:5000 1:25,000

凝胶建议：推荐使用3-8% Tris-醋酸凝胶进行电泳分离，以有效分离ATM大蛋白（约350 kDa）。

免疫沉淀（IP）

推荐用量：6 µg 抗体 / mg 细胞裂解液

操作要点：

1. 将6 µg抗体与含1 mg蛋白的细胞裂解液混合

2. 4°C孵育1-2小时或过夜

3. 加入蛋白A/G琼脂糖珠，继续孵育1-2小时

4. 充分洗涤沉淀复合物（建议4-5次）

5. 使用SDS上样缓冲液洗脱，煮沸变性后进行WB检测

免疫组织化学（IHC）

推荐稀释度：1:500 1:2000

重要注意事项：不建议进行抗原修复（Epitope retrieval is not recommended）。常规的加热或酶修复可能破坏该抗体识别的表位结构，建议直接使用未修复的石蜡切片或冰冻切片进行染色。

产品背景信息

蛋白功能概述

ATM基因是导致神经退行性疾病——共济失调性毛细血管扩张症（Ataxia Telangiectasia, AT）的致病基因。AT的临床特征包括神经退行性变、免疫功能障碍、对DNA损伤的敏感性增加以及癌症易感性。ATM是一种蛋白激酶，在DNA损伤应答（DDR）中处于核心枢纽地位。

分子机制

在DNA双链断裂（DSBs）发生时，ATM被迅速激活，并启动级联磷酸化信号，其底物包括：

p53：调控细胞周期停滞和凋亡

BRCA1：参与同源重组修复

p53结合蛋白（53BP1）：调控DNA修复途径选择

CHK2：检查点激酶，介导细胞周期阻滞

RAD9、RAD17：参与检查点激活

MDM4：调节p53活性

通过磷酸化上述底物，ATM协调DNA修复、细胞周期检查点、细胞衰老和凋亡等响应，维护基因组稳定性。

研究意义

由于ATM在DNA损伤应答及肿瘤抑制中的关键作用，高特异性的ATM抗体对于以下研究至关重要：

DNA双链断裂修复机制解析

抗癌药物（如PARP抑制剂、放疗）敏感性评估

共济失调性毛细血管扩张症的分子病理研究

ATM信号通路中新型底物的筛选与验证

储存与稳定性注意事项

1. 保存温度：2-8°C，请勿冷冻。ATM作为大分子蛋白抗体，反复冻融会导致抗体变性及活性显著下降。

2. 有效期：收货之日起1年内稳定。

3. 防腐剂：缓冲液中含有0.09%叠d化钠，使用时应遵守实验室安全规范。

4. 分装建议：如需长期使用，可将抗体分装成单次用量的小份，但仍保存于2-8°C，避免冷冻。

功能性优势总结

1. 超高浓度（1000 µg/ml）：提供充足的抗体总量，适合大规模或长期系列实验，降低批次间差异风险。

2. 宽WB稀释范围（1:5000-1:25,000）：提供极大实验灵活性，可根据靶蛋白表达丰度自由调整。

3. 三重应用验证：IHC、IP、WB均经优化验证，尤其适用于DNA损伤研究中的多维度检测需求。

4. 大蛋白检测优化：明确建议使用3-8% Tris-醋酸凝胶，针对性解决ATM（~350 kDa）转印效率低的常见问题。

5. IP-WB配套方案：提供抗轻链HRP二抗及猪血清封闭建议，有效避免沉淀中重链干扰，确保IP产物检测结果清晰。

6. 明确IHC限制条件：指出抗原修复不推荐，避免用户因操作不当导致假阴性结果。

注意事项

由于ATM分子量较大（约350 kDa），转膜条件建议采用湿转法，时间延长至2-3小时或使用低电压过夜转膜。

对于组织IHC染色，建议使用阳性对照（如正常扁桃体或睾丸组织）验证抗体性能。

IP实验前建议通过WB验证裂解液中ATM的表达水平，必要时增加抗体用量至9-12 µg/mg裂解液。