兔抗SMC1抗体亲和纯化现货促销，买对不买贵

SMC1 是 cohesin 复合物的核心组分，在染色体组织、姐妹染色单体粘连、DNA 修复和基因表达调控中发挥关键作用。本文基于兔抗SMC1抗体亲和纯化（货号：A300-055A） 的详细规格信息，从产品特性、应用条件、实验流程及背景知识四个维度进行系统性阐述，旨在为科研人员提供可直接参考的技术文档，该产品由艾美捷Bethyl Laboratories推出。

一、产品基本规格与储存操作

参数  | 内容    

反应性| 小鼠、人类

应用  | IHC（免疫组织化学）、IP（免疫沉淀）、WB（免疫印迹）

宿主/克隆性| 兔 / 多克隆

形式  | 完整 IgG

免疫原| 位于第1183位残基至C末端之间的区域

亚型  | IgG

标记物| 未标记

纯度  | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人类

浓度| 1000 µg/ml（即 1 mg/ml）

保存条件| 2 – 8 °C

有效期| 自收货之日起 1 年

缓冲液| Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液，pH 7–8，含 0.09% 叠d化钠

操作提示：  

叠d化钠作为防腐剂，若用于活细胞实验需通过透析或超滤去除。  

抗体浓度采用比尔定律测定（1 mg/mL IgG 在 A280 处吸光度为 1.4），用户可根据此值自行稀释验证。

二、免疫原与表位定位

该抗体识别的人类 SMC1 蛋白表位位于 第 1175 位残基与 C 末端之间（参考序列 NP_006297.2，GeneID 8243）。具体地，免疫原对应第 1183 位至 C 末端的区域，通过亲和纯化方式将特异性识别该表位的抗体富集出来。这种设计确保抗体对 SMC1 的 C 端结构域具有高特异性，尤其适合检测全长 SMC1 以及可能存在的 C 端截短体（需结合分子量对照验证）。

三、推荐应用与实验条件

1. 免疫印迹（Western Blot, WB）

稀释范围：1:2 000 – 1:10 000  

封闭液与抗体稀释液：5% 脱脂牛奶 / TBST  

一抗孵育：建议 4 °C 过夜（或室温 2 小时，但灵敏度可能下降）  

二抗注意事项：  

检测细胞裂解液时，推荐使用山羊抗兔 IgG（H+L）HRP 标记二抗（如 A120-101P）。  

检测免疫沉淀产物时，为避免变性 IgG 重链（≈55 kDa）与目标蛋白（SMC1 约 150 kDa）信号干扰，必须使用兔 IgG 轻链特异性 HRP 二抗。同时建议在封闭液中加入 5% 正常猪血清（Cat. No. S100-020）以降低非特异性背景。

建议阳性对照：HeLa、HEK293 或小鼠胚胎成纤维细胞全裂解液。SMC1 在多种人及小鼠细胞系中普遍表达。

2. 免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）

使用量：6 μg 抗体 / mg 总蛋白裂解液  

步骤简要：  

1） 制备裂解液（推荐使用非变性裂解缓冲液，如 50 mM Tris pH 7.4, 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.5% 脱氧胆酸钠，添加蛋白酶抑制剂）。  

2）每 mg 总蛋白加入 6 μg 抗体，4 °C 旋转孵育 2 小时或过夜。  

3）加入 Protein A/G 磁珠（或琼脂糖珠），继续孵育 1-2 小时。  

4）洗涤 3-5 次后，用 SDS 上样缓冲液洗脱，进行 WB 检测。

3. 免疫组织化学（Immunohistochemistry, IHC）

稀释范围：1:2 000 – 1:10 000  

抗原修复：推荐使用 柠檬酸钠缓冲液（pH 6.0） 进行热修复（如微波或高压锅煮沸 10-15 分钟）。  

适用样本：福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）的人或小鼠组织切片。  

检测系统：建议采用生物素-链霉亲和素-HRP 或聚合物法，DAB 显色。阴性对照可用兔 IgG 同型对照或仅使用二抗。

经验提示：多克隆抗体在 IHC 中可能出现核浆背景，建议滴定从 1:5000 开始，并用正常血清封闭至少 30 分钟。

四、SMC1 功能背景与抗体应用意义

1. 分子生物学功能

SMC 家族蛋白（结构维持染色体蛋白）参与形成 cohesin 和 condensin 复合物。其中 cohesin 核心复合物由 SMC1 和 SMC3 异源二聚体构成，通过形成环状结构将姐妹染色单体从 DNA 复制期至有丝分裂中期“拥抱”在一起。这一过程对于：

姐妹染色单体分离：有丝分裂后期，separase 切割 cohesin 亚基 RAD21 释放染色单体。  

DNA 双链断裂修复：同源重组修复依赖 cohesin 将断裂点与同源序列拉近。  

基因转录调控：cohesin 通过介导染色质环构建，影响增强子-启动子通讯。

2. 疾病相关性

人类 _SMC1A_ 基因突变可导致 Cornelia de Lange 综合征（CdLS2 型），表现为颅面畸形、生长迟缓和智力障碍。此外，SMC1 在多种癌细胞中异常表达，影响基因组稳定性。因此，特异性的 SMC1 抗体不仅用于基础研究，也适用于疾病机制探索。

3. 该抗体的优势

C 末端表位：避免与 N 端截短蛋白发生交叉反应，在检测全长 SMC1 时信号更可靠。  

宽稀释范围：从 1:2000 至 1:10000 均可获得清晰条带，允许用户根据样本丰度灵活优化。  

多应用验证：同时适用于 WB、IP、IHC，减少不同实验间抗体批次的差异。  

稳定性：在 2–8 °C 可保存一年，便于日常取用，不需要分装冻存（但需避免反复升温至室温过久）。

总结

A300-055A 是一款经亲和纯化的兔抗 SMC1 多克隆抗体，识别人类及小鼠 SMC1 蛋白 C 端区域（1183–末端），适用于 WB、IP 和 IHC。其优化的缓冲体系、明确的稀释范围以及针对性配套二抗方案，能够帮助研究者稳定检测 cohesin 复合物行为。实验人员应严格遵守储存条件、根据应用选择适当的二抗和封闭策略，并利用阳性对照进行批次间验证。对于涉及染色体结构、DNA 修复及发育相关基因调控的研究，该抗体是一个功能可靠的工具。