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已认证公司新闻/正文
19 人阅读发布时间:2026-05-12 15:53
产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的XRN2抗体(货号A301-103A)是一款针对人源5′→3′核酸外切酶2(XRN2)的兔多克隆抗体,经抗原亲和纯化,以未偶联完整IgG形式提供。该抗体可识别小鼠及人类样本中的XRN2蛋白,适用于免疫印迹、免疫沉淀及免疫组织化学检测,为RNA代谢及转录终止调控研究提供可靠工具。
核心规格参数
参数 详细信息
靶标 XRN2(5′-3′ exoribonuclease 2)
反应性 小鼠、人类
宿主 兔
克隆性 多克隆
免疫原 第900位氨基酸至C端区域
抗体形式 完整IgG
同型 IgG
偶联物 未偶联
纯度 抗原亲和纯化
抗原种属 人类
浓度 200 µg/ml
缓冲液 Tris缓冲盐水,含0.1% BSA及0.09%叠d化钠
储存条件 2–8 °C
保质期 到货后1年
免疫原与特异性验证
A301-103A抗体采用固相载体上固定的XRN2特异性表位进行亲和纯化。该抗体识别的表位位于人XRN2蛋白的第900至950位氨基酸之间(参考编号NP_036387.2,GeneID 22803)。免疫球蛋白浓度依据比尔定律测定:1 mg/mL IgG在A280波长处的吸光度为1.4。
特异性验证要点:
经抗原亲和纯化,显著降低非特异性交叉反应
免疫原区域位于蛋白C端(900–950 aa),该区域在不同物种间保守性较高,支持小鼠与人样本的交叉检测
建议通过预吸附实验或使用敲除裂解物作为阴性对照,进一步验证特异性
应用方法与推荐工作浓度
免疫印迹(WB)
推荐稀释范围:1:5,000 – 1:25,000
实验方案要点:
封闭液及抗体稀释液:含5%脱脂牛奶的TBST
一抗孵育条件:4°C孵育过夜(建议)
细胞裂解液检测:使用山羊抗兔IgG重链+轻链抗体(货号A120-101P)作为二抗
免疫沉淀物检测:使用兔IgG轻链特异性HRP二抗,并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清(货号S100-020)以降低背景
> 功能性提示:宽稀释范围(1:5000–1:25000)允许用户根据目标蛋白丰度灵活优化信噪比。对于高表达样本,可使用1:25000稀释以节省抗体;对于低表达或免疫沉淀后的检测,建议从1:5000开始梯度测试。
免疫沉淀(IP)
推荐用量:6 µg 抗体 / mg 细胞裂解物
操作注意事项:
裂解缓冲液中建议添加蛋白酶抑制剂,防止XRN2降解
抗体与裂解物共孵育时间:4°C旋转孵育2小时至过夜
使用Protein A/G磁珠或琼脂糖珠捕获免疫复合物
洗脱后建议用轻链特异性二抗进行WB检测,避免重链信号(约55 kDa)干扰XRN2目标条带(预期分子量约120 kDa)
免疫组织化学(IHC)
推荐稀释范围:1:500 – 1:2000
抗原修复条件:
对于福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片,推荐使用pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液进行热诱导抗原修复
可对比尝试pH 9.0 Tris-EDTA缓冲液,但根据产品信息,pH 6.0为更优选择
靶点生物学背景:XRN2
XRN2(5′-3′ exoribonuclease 2)是一种进化保守的5′→3′方向核酸外切酶,在RNA代谢中发挥关键作用。
核心功能:
转录终止:XRN2参与RNA聚合酶II介导的转录终止过程。当poly(A)信号被识别并完成3′端切割后,XRN2降解下游切割产生的RNA片段,触发转录终止。
mRNA 3′端加工:负责降解3′端切割后下游的RNA产物,确保成熟的mRNA 3′端形成。
质量控制:参与异常RNA的降解清除。
储存与稳定性指南
储存温度:2–8°C,请勿冷冻。反复冻融会导致抗体聚集或活性下降。
防腐剂:0.09%叠d化钠,可抑制微生物生长。注意叠d化钠对某些细胞实验可能有毒性,如需去除,可通过透析或脱盐柱处理。
稳定剂:0.1% BSA,降低非特异性吸附及管壁损耗。
有效期:自到货之日起1年。建议分装成单次使用量储存于2–8°C,避免反复开管。
应用场景推荐
1. 转录终止机制研究:结合RNA聚合酶II ChIP或run-on实验,利用XRN2抗体检测其在基因3′端的富集变化。
2. RNA加工复合物互作分析:通过免疫沉淀结合质谱鉴定XRN2的相互作用蛋白(如p54nrb/PSF)。
3. 组织表达谱定位:利用IHC检测XRN2在正常组织与病理组织(如肿瘤)中的定位及表达差异。
4. 基因敲低表型验证:以WB方式验证siRNA或CRISPR介导的XRN2沉默效率。
总结:A301-103A抗体是一款经过亲和纯化、验证了多种应用的多克隆抗体,覆盖小鼠及人源XRN2检测。其宽稀释范围(WB 1:5000–1:25000)、明确免疫原定位(900–950 aa)及优化的IHC修复条件(pH 6.0柠檬酸盐),为RNA代谢研究提供了高性价比的免疫检测工具。遵循上述实验参数及问题排查建议,可有效提高实验成功率和数据可重复性。
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