谷胱甘肽检测试剂盒现货促销，件件特价

一、谷胱甘肽检测的生物学意义

谷胱甘肽（GSH）是细胞内含量最丰富的非蛋白硫醇，在维持氧化还原平衡、清除活性氧、解毒外源性化合物以及调节细胞信号转导中发挥核心作用。GSH 易被氧化为二硫键形式的 GSSG（氧化型谷胱甘肽），细胞内 GSH/GSSG 比值常被用作评估氧化应激状态的关键指标。准确测定生物样本中的总谷胱甘肽（GSH + GSSG）或分别定量 GSH 与 GSSG，对于研究氧化损伤、药物毒性、神经退行性疾病及代谢紊乱等具有重要意义。

由艾美捷代理的Cayman 公司的 GSH 检测试剂盒（货号：703002）提供了一种经过优化的酶循环法检测方案，能够灵敏、特异地定量血浆、组织匀浆及培养细胞中的总谷胱甘肽含量，并支持单独测定 GSSG 的替代流程。

二、检测原理

本试剂盒采用谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase）介导的酶循环放大技术，结合经典的 Ellman 试剂显色反应。其核心反应步骤如下：

1. 巯基反应：样品中的 GSH 其巯基（-SH）与 DTNB（5,5’-二硫代双-2-硝基b甲酸，即 Ellman 试剂）反应，生成黄色产物 TNB（5-硫代-2-硝基b甲酸）以及混合二硫化物 GSTNB（GSH 与 TNB 的偶联物）。

2. 酶循环再生：谷胱甘肽还原酶将 GSTNB 中的 GSH 部分还原释放，同时产生更多的 TNB。释放出的 GSH 可再次与剩余的 DTNB 反应，形成持续的循环放大过程。

3. 定量检测：TNB 在 405 nm 或 412 nm 处具有特征吸收峰。在循环反应中，TNB 的生成速率与循环反应速率成正比，而循环速率又直接与样品中 GSH 的初始浓度成正比。通过测定一定时间内的吸光度变化速率，即可准确定量样品中的总谷胱甘肽含量。

关键优势：由于反应体系中包含谷胱甘肽还原酶，原本以 GSSG 形式存在的谷胱甘肽也会被还原为 GSH 并参与循环反应，因此试剂盒默认测定的是总谷胱甘肽（GSH + GSSG）。若用户需要单独测定 GSSG 含量，可按照说明书提供的替代流程进行操作（通常需先使用特定试剂掩蔽原有 GSH，再测定 GSSG 还原后产生的信号）。

三、样品处理与制备

3.1 适用样本类型

血浆

组织匀浆

培养细胞

3.2 关键前处理步骤：去蛋白

几乎所有类型的生物样本在检测前均需进行去蛋白处理。这是因为样本中的蛋白质（尤其是含巯基的酶或白蛋白）可能干扰 DTNB 反应，或导致背景吸光度升高。常用的去蛋白方法包括加入磺基水杨酸、偏磷酸或高氯酸，离心去除沉淀后用上清液进行检测。具体去蛋白试剂和操作步骤请参考试剂盒说明书。

3.3 样品保存注意事项

GSH 易被空气氧化，样品处理应在低温（如冰上）条件下快速完成。

去蛋白后的上清液若不能立即测定，可短期冻存（-80°C），但应避免反复冻融。

四、试剂盒组成与储存运输

4.1 运输条件

美国本土内运输：湿冰（wet ice）

其他地区：运输条件可能有所不同，具体以当地物流要求为准

4.2 储存条件

储存温度：4°C（冷藏，不可冷冻）

按照标签指示保存，所有组分在有效期内保持稳定

4.3 需要但未提供的物品

超纯水（推荐 Milli-Q 或等效纯度的去离子水）：用于配制缓冲液、稀释标准品及样品。普通蒸馏水可能含有杂质干扰酶反应，必须使用高纯度水。

其他可能需要的耗材或试剂（如去蛋白试剂、微孔板等），请下载完整试剂盒说明书核对。

五、性能特点与适用性

5.1 方法学优势

高灵敏度：酶循环放大机制使得低浓度 GSH 仍可被准确检测。

特异性强：基于巯基与 DTNB 的特异性反应及谷胱甘肽还原酶的专一性还原，不受其他生物硫醇（如半胱氨酸、同型半胱氨酸）的显著干扰。

线性范围宽：通过调整样品稀释倍数可覆盖生理及病理相关浓度范围。

可同时测定总 GSH 与 GSSG：提供标准流程和替代流程，满足不同研究需求。

5.2 样本适用性

已验证适用于血浆、组织匀浆和培养细胞。其他生物样本（如尿液、细胞培养上清）可能需要额外验证去蛋白步骤的兼容性。

六、注意事项与安全信息

1. 产品限制：本产品仅供研究使用（Research Use Only），不适用于人类或兽医临床诊断或治疗。

2. 操作规范：DTNB 和反应产物 TNB 可能对皮肤和眼睛有刺激性，操作时应佩戴实验手套和护目镜。

3. 时间控制：动力学读数应在加入 NADPH 后立即开始，确保初始速率捕获准确。所有样品和标准品建议设置复孔。

4. 去蛋白完整性：去蛋白不彻底可能导致高估背景或抑制酶活性。建议在预实验中验证沉淀效果。

文献参考：

1. Baker, M.A., Cerniglia, G.J., and Zaman, A. Microtiter plate assay for the measurement of glutathione and glutathione disulfide in large numbers of biological samples. Anal. Biochem. 190, 360-365 (1990).

2. Eyer, P., and Podhradsky, D. Evaluation of the micromethod for determination of glutathione using enzymatic cycling and Ellman’s reagent. Anal. Biochem. 153, 57-66 (1986).

3. Tietze, F. Enzymic method for quantitative determination of nanogram amounts of total and oxidized glutathione: Applications to mammalian blood and other tissues. Anal. Biochem. 27, 502-522 (1969).