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已认证公司新闻/正文
64 人阅读发布时间:2026-08-13 15:56
一、产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗人53BP1多克隆抗体(货号:A300-272A),特异性识别人53BP1蛋白中间区域(第350~400位氨基酸)。53BP1是DNA双链断裂(DSB)损伤应答通路中的关键早期响应因子,在DNA修复检查点激活及修复蛋白招募中发挥核心作用。该抗体经严格验证,适用于免疫组织化学、免疫沉淀及蛋白免疫印迹等应用,是DNA损伤修复与肿瘤抑制机制研究的理想工具。
二、产品规格与质量参数
项目 | 规格
靶标 | 53BP1(TP53BP1)
验证种属 | 小鼠、人类
宿主/克隆性 | 兔多克隆(Whole IgG)
免疫原 | 人53BP1蛋白(NP_005648.1)第350~400位氨基酸区域对应的重组表位肽段
纯化方式 | 抗原亲和纯化(固定化表位特异性支持物)
浓度 | 1000 µg/mL(A280法测定,1 mg/mL IgG吸光系数1.4)
缓冲体系 | Tris-柠檬酸-磷酸盐缓冲液,pH 7~8,含0.09%叠d化钠(防腐剂)
储存条件 | 2~8°C(请勿冷冻)
有效期 | 自收货之日起1年
三、应用与推荐稀释比例
应用体系 | 推荐稀释/使用浓度 | 关键操作备注
蛋白免疫印迹(WB) | 1:10,000 ~ 1:25,000 | 推荐使用3~8% Tris-醋酸凝胶进行大分子量蛋白分离;封闭液/抗体稀释液:5% Milk-TBST;一抗孵育过夜(4°C)
WB(细胞裂解液直接检测) | 按WB范围 | 二抗推荐抗兔IgG重+轻链抗体(如A120-101P)
WB(IP后检测) | 按WB范围 | 二抗推荐抗兔IgG轻链HRP偶联物,封闭液中加5%正常猪血清以减少重链干扰
免疫沉淀(IP) | 6 µg/mg 总蛋白裂解液 | 每mg裂解物使用6 µg抗体
免疫组织化学(IHC) | 1:1,000 ~ 1:5,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)进行热诱导抗原修复(适用于FFPE切片)
四、靶点生物学背景
53BP1(p53结合蛋白1)是DNA双链断裂损伤应答通路中的关键早期响应因子,其核心功能包括:
损伤感应与信号放大:DSB发生后,53BP1被迅速招募至损伤位点,通过ATM依赖性和非依赖性途径参与下游效应蛋白(如Brca1、Chk2)的磷酸化激活。
修复途径选择:53BP1在同源重组(HR)与非同源末端连接(NHEJ)修复途径的平衡中发挥调控作用,偏向促进NHEJ,其功能异常可导致基因组不稳定性。
层级招募功能:53BP1在DNA损伤位点形成核灶(foci),是Brca1灶形成所必需的上游信号组分,在分级分支通路中协调修复蛋白的有序招募。
五、别名
53BP1;p202;p53-binding protein 1;p53BP1;TDRD30;TP53-binding protein 1;tumor protein 53-binding protein, 1;tumor suppressor p53-binding protein 1
六、使用与储存注意事项
避免反复冻融:本品为液体形式,请于2~8°C持续保存,切勿冷冻。
防腐剂提示:缓冲液含0.09%叠d化钠,进行活细胞实验或体内应用前请透析去除。
凝胶选择:53BP1分子量较大(~208 kDa),WB检测时推荐使用3~8% Tris-醋酸梯度凝胶以获得最佳分离效果。
阳性对照推荐:电离辐射(如γ射线)或喜树碱处理的HeLa细胞裂解液可诱导53BP1核灶形成,适合作为WB阳性对照。
批次间差异:多克隆抗体可能存在批次间效价差异,建议新批次首次使用前进行滴定优化。
*本手册信息基于出厂批次验证数据,具体实验条件可能因样本类型及实验室环境而异,建议用户根据实际体系进行预实验优化
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