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【PI3KgHis】重组人磷酸肌醇3-激酶alpha p110g,Recombinant Human Discoidin Domain Receptor Tyrosine Kinase 2
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重组人PI3激酶p110α(H1047R)/p85α复合物,品质验证,正在促销,买的放心

62 人阅读发布时间:2026-08-25 13:42

产品概述

由艾美捷代理BPS Biosciences推出的重组人I类磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)异源二聚体复合物(FLAG标签)(货号:40641),由催化亚基p110α(PIK3CA)与调节亚基p85α(PIK3R1)组成,是研究PI3K/AKT/mTOR信号通路、进行抑制剂筛选及选择性分析的关键工具酶。

 

分子结构与序列设计

催化亚基p110α (H1047R):涵盖人p110α第2至1068位氨基酸(全长),其N端携带FLAG标签,便于检测与免疫沉淀。该亚基引入了临床上重要的激活突变H1047R,该突变常见于多种癌症,可使激酶活性持续升高。

调节亚基p85α:涵盖人p85α第1至724位氨基酸(全长),无任何融合标签,以保持其天然构象和调节功能。

两个亚基在Sf9昆虫细胞中共表达,通过亲和纯化获得稳定、有活性的胞内复合物,分子量分别为125 kDa(p110α)和84 kDa(p85α)。

 

生化特性与质量控制

纯度:经SDS-PAGE鉴定,产品纯度≥80%,满足大多数体外生化实验需求。

缓冲体系:产品提供于含25 mM Tris-HCl (pH 8.0)、69 mM NaCl、1.35 mM KCl、0.025% Tween-20、3 mM DTT及50%甘油的保护性水溶液中,该配方在保障酶稳定性的同时,兼容多种下游实验体系。

储存稳定性:在-80°C条件下,本品可稳定保存至少6个月。建议分装保存,避免反复冻融,使用时冰上融化并轻轻混匀,切勿涡旋振荡。

 

酶学活性验证

本产品的酶活性已通过ADP-Glo®发光法严格验证。标准验证条件如下:

反应体系:40 mM Tris-HCl (pH 7.5)、10 mM MgCl₂、100 μM ATP、200 μM PI3K底物(BPS Bioscience #40560)。

反应条件:30°C孵育18分钟。

检测方法:通过检测ATP向ADP的转化量来定量激酶活性。

在此条件下,该复合物的比活性为1,770 pmol/min/μg,确保了其在酶动力学研究中的高灵敏度与可靠性。

 

背景与应用价值

p110α催化亚基与p85α调节亚基共同构成I类IA型PI3K,该激酶通过将PIP2转化为PIP3,激活下游AKT等效应分子,深度参与细胞增殖、存活与代谢调控。p110α的H1047R突变是多种实体瘤(如乳腺癌、结直肠癌)中的高频驱动突变,使其成为抗癌药物研发的重要靶点。

 

本品可直接用于:

1.  酶动力学研究:测定突变型PI3K的Km、Vmax等参数。

2.  抑制剂筛选:评估小分子化合物、抗体或降解靶向嵌合体(PROTAC)对突变型PI3K的抑制活性。

3.  选择性谱分析:对比不同PI3K亚型或突变体对抑制剂响应差异,助力开发高选择性、低毒性的下一代抗肿瘤药物。

 

操作注意事项

解冻与取样:冰上解冻,使用前轻轻混匀并短暂离心,确保溶液均一。

分装保存:建议按单次用量分装后液氮速冻,长期保存于-80°C。

应用范围:本品仅供研究用途(Research Use Only),不可用于临床诊断或治疗。

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