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11 人阅读发布时间:2026-09-03 15:12
产品概述
由艾美捷代理Cell Biolabs推出的CytoSelect™ 24孔细胞收缩检测试剂盒(漂浮基质模型)(货号:CBA-5020)提供了一套简便的体外系统,用于评估细胞收缩能力及筛选细胞收缩调控因子。本试剂盒采用专利设计的细胞收缩培养板,省去了传统收缩检测中繁琐的基质释放步骤,显著提升了检测效率与通量。每套试剂盒包含一块24孔板及配套试剂,可完成24次检测。
检测原理
创面愈合涉及再上皮化、结缔组织沉积和收缩三个过程,其中收缩过程主要由称为肌成纤维细胞的特化成纤维细胞介导。三维胶原凝胶模型已广泛应用于成纤维细胞收缩、整合素信号、细胞凋亡及细胞骨架重组等研究领域。
本试剂盒采用漂浮基质收缩模型:将含细胞的胶原溶液在特制培养板中聚合后,基质自动从板底释放并漂浮于培养基中。在该模型下,细胞在无外部机械负荷的条件下发生收缩,不产生应力纤维,从而反映细胞内在的收缩能力。与传统贴壁模型相比,漂浮模型更适用于研究生长因子、药物等可溶性因子对细胞收缩的调控作用。例如,溶血磷脂酸(LPA)和血小板源性生长因子(PDGF)均能有效刺激漂浮基质收缩,为机制研究提供了理想平台。
试剂盒组分与储存
本试剂盒包含两个运输包装,所有组分收到后请于4℃储存:
Box 1(室温运输)
-24孔细胞收缩培养板(漂浮模型):1块,预包被抗黏附基质
Box 2(蓝冰运输)
胶原蛋白溶液:10 mL,牛I型胶原,3.0 mg/mL
-中和液:0.5 mL
-5× DMEM培养基:5 mL
-5× PBS:5 mL
-100×细胞收缩抑制剂:1 mL,1 M BDM(溶于DMSO)
操作流程
1. 胶原基质制备
按比例混合胶原蛋白溶液、5× DMEM、中和液及细胞悬液,调节pH至中性
将混合液加入24孔收缩培养板中,每孔0.5-1 mL
37℃孵育30-60分钟使胶原聚合
2. 诱导收缩
聚合完成后,基质自动从板底释放,呈漂浮状态
加入含待测因子(如LPA、PDGF等)的培养基
37℃孵育,根据实验需求选择收缩时间(通常为2-24小时)
3. 测量与数据分析
收缩程度通过测量凝胶直径或面积进行评估
可通过扫描或拍照后使用图像分析软件定量
以BDM处理的细胞作为收缩抑制对照,计算相对收缩率
数据解读与质控建议
1. 阳性对照:建议设置LPA刺激组作为阳性对照,确保系统正常工作
2. 阴性对照:使用收缩抑制剂BDM处理组,用于扣除背景
3. 细胞数量优化:建议预实验确定最佳细胞接种密度(通常为1-5×10⁵ cells/mL)
4. 复孔设置:每个条件建议设2-3个复孔以提高数据可靠性
应用场景
本试剂盒适用于:药物或化合物对细胞收缩影响的筛选、收缩相关信号通路研究、疾病模型中细胞收缩功能评估、以及不同细胞类型(如成纤维细胞、平滑肌细胞)收缩能力比较等研究领域。
文献参考
1. Martin, P. (1997) Science 276, 75-81
2. Bell, E., Ivarsson, B., and Merrill, C. (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 76, 1274-1278
3. Stupak, D., and Harris, A. K. (1982) Dev. Biol. 90, 383-398
4. Mochitate, K., Pawelek, P., and Grinnell, F. (1991) Exp. Cell Res. 193, 198-207
5. Tian, B., Lessan, K., Kahm, J., Kleidon, J., and Henke, C. (2002) J. Biol. Chem. 277, 24667-24675
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