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0 人阅读发布时间:2026-09-04 13:15
一、产品概述与核心价值
由艾美捷代理Cell Biolabs推出的OxiSelect™ 体外活性氧/活性氮检测试剂盒(绿色荧光,货号STA-347,96次规格)是一款专为定量检测样本中总自由基水平设计的功能型试剂盒。其核心技术基于淬灭荧光探针DCFH-DiOxyQ,该探针经去淬灭处理后转化为高反应活性的DCFH形式,能够与样本中的ROS/RNS(包括过氧化氢、过氧自由基、一氧化氮和过氧亚硝酸根阴离子)发生特异性氧化反应,生成具有强烈绿色荧光的DCF产物。荧光强度与总ROS/RNS水平呈正比,检测灵敏度可达DCF 10 pM、过氧化氢40 nM。
二、适用场景与科研价值
氧化应激在血管疾病、糖尿病、肾缺血,动脉粥样硬化,肺部病变,炎症性疾病,癌症及衰老等多种病理过程中扮演关键角色。本试剂盒适用于以下研究场景功能:
1、总自由基水平评估;定量测定细胞培养上清,组织匀浆或体液样本中的总体氧化应激状态
2、抗氧化功效评估:对比添加候选抗氧化剂前后样本荧光强度的变化,判断其清除自由基的能力
3、药物安全性筛选:检测化合物是否诱导氧化应激升高,作为 毒性评价指标之一
三、操作流程与关键参数
核心步骤
将待测样本或标准品加入96孔荧光板孔中,同时加入催化剂加速氧化反应
经短暂孵育后,加入已制备的DCFH探针工作液
室温避光反应适当时间后,使用荧光酶标仪(激发波长480 nm,发射波长530 nm)读取荧光值
通过过氧化氢或DCF标准曲线计算样本中总自由基含量
关键质控点:
探针制备需严格按说明书操作,确保淬灭去除完全
反应体系应避光进行,防止光漂白导致信号衰减
建议设置阳性对照(如已知过氧化氢浓度)和空白对照,确保批次间数据可比性
四、试剂盒组分与储存须知
试剂盒含以下组分(室温运输,但建议收到后按照条件保存):
引物试剂250 µL、稳定缓冲液(10×)1.5 mL、催化剂(250×)20 µL、DCF-DiOxyQ探针50 µL(甲醇溶液,琥珀色管避光保存)、DCF标准品100 µL(1 mM DMSO溶液)、过氧化氢标准品100 µL(8.821 M溶液)。各组分启封后应严格避免反复冻融,探针及标准品需避光防潮保存。
五、配套产品推荐
为构建完整的氧化应激研究体系,建议搭配以下关联试剂盒使用:
STA-330:TBARS检测试剂盒(MDA定量,评估脂质过氧化)
STA-340:超氧化物歧化酶活性检测试剂盒
STA-341:过氧化氢酶活性检测试剂盒
STA-342:细胞内ROS检测试剂盒(绿色荧光,适用于活细胞成像)
STA-832:MDA加合物竞争性ELISA试剂盒
本试剂盒提供96次反应用量,涵盖标准曲线及未知样本检测需求。结果判定需结合实验设计设置合理对照,并注意不同样本基质可能对荧光信号产生干扰,必要时需进行样本稀释或基质匹配校准。
文献参考
1. Bass DA, Parce JW, Dechatelet LR, Szejda P, Seeds MC, Thomas M. Flow cytometric studies ofoxidative product formation by neutrophils: A graded response to membrane stimulation. J Immunol.1983; 130:1910-1917.
2. Brandt R, Keston AS. Synthesis of diacetyldichlorofluorescin: A stable reagent for fluorometricanalysis. Anal Biochem. 1965; 11:6-9.
3. Keston AS, Brandt R. The fluorometric analysis of ultramicro quantities of hydrogen peroxide. AnalBiochem.1965; 11:1-5.
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