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17 人阅读发布时间:2026-09-09 14:17
产品概述
由艾美捷代理Cytoskeleton推出的Tubulin protein (rhodamine): porcine brain(Cat. #TL590M)是一种罗丹明荧光标记的微管蛋白制剂,来源于猪脑组织。微管蛋白由α-微管蛋白和β-微管蛋白两个高度同源的55 kDa亚基组成异二聚体,这两个亚基由不同基因编码,其序列在整个真核色花姑娘无中高度保守。因此,猪源微管蛋白与绝大多数真核生物来源的微管蛋白具有高度同源性,可用于检测源自多种物种的蛋白质相互作用,具有良好的技术通用性。
微管蛋白聚合形成微管结构:聚合起始阶段先形成原丝,每根微管由13根原丝组成,直径为25 nm,每微米微管长度包含约1650个异二聚体。微管具有高度有序的结构和内在极性,是细胞骨架的重要组成部分。
核心性能参数
参数 | 指标
激发波长(Ex) | 547 nm
发射波长(Em) | 576 nm
光谱范围 | 橙色
标记化学 | 随机表面赖氨酸经活化酯偶联
标记计量比 | 每异二聚体约1-2个染料分子
蛋白纯度 | >99%(考马斯亮蓝染色SDS-PAGE扫描光密度法)
聚合活性 | >80%(沉降法验证)
剂型 | 冻干粉末
关键特性
1. 高纯度
经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和考马斯亮蓝染色后,通过扫描光密度法评估蛋白纯度,确定为>99%,确保实验结果的可靠性和可重复性。
2、高生物学活性
TL590M微管蛋白保留高生物学活性,经沉降法验证,超过80%的微管蛋白能够在体外聚合形成微管,其性能与未修饰微管蛋白相当,确保下游实验结果的生理相关性。
3、稳定的荧光标记
罗丹明染料通过活化酯偶联于微管蛋白的表面赖氨酸残基,每异二聚体标记约1-2个荧光分子,在保证足够信号强度的同时,最大限度减少染料对蛋白功能的影响。
主要应用方向
体外驱动蛋白运动型分析:作为荧光标记微管底物,实时追踪驱动蛋白沿微管的运动
微管动力学研究:体外观察微管聚合与解聚动态过程
微管相关蛋白(MAPs)及药物效应分析:评估MAPs或微管靶向药物对微管动力学的影响
物种通用性优势
由于微管蛋白序列在真核生物中高度保守,猪脑来源的微管蛋白可广泛适用于检测来自不同物种的蛋白质样本,在药物筛选和跨物种对比研究中尤为便利,避免了物种特异性差异带来的实验偏差。
储存与操作建议
冻干粉末请于-80°C长期保存。复溶时推荐使用适当的缓冲液(如PEM缓冲液:100 mM PIPES、1 mM EGTA、1 mM MgCl₂,pH 6.8)配制成适宜浓度的储存液。建议分装保存,避免反复冻融。荧光标记蛋白需避光保存,防止荧光淬灭。
文献参考
1. Amos, L.A. & Klug A. 1974. J. Cell Sci. 14:523-530
2. Shelanski M.L. et al. 1973. Proc. Natl. Acac. Sci. USA. 70:765-768.
3. Piehl M. and Cassimeris L. 2003. Organization and dynamics of growing microtubule plus ends during early mitosis.Mol. Biol. Cell 14: 916-925.
4. Hyman A.A. et al. 1992. Microtubule motor activity of ayeast centromere-binding complex. Nature 359: 533-536.
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