人源重组驱动蛋白KIF4（GST标签）限时促销：微管激活ATPase活性保障

产品概述

KIF4（Chromokinesin，即染色体驱动蛋白）属于驱动蛋白-4家族，是一种参与细胞分裂过程中染色体凝缩，纺锤体形成及胞质分裂的驱动蛋白马达蛋白，该蛋白在细胞内物质运输和遗传物质正确分离中发挥关键作用，对维持基因组稳定性至关重要。本品为野生型人源KIF4马达结构域，通过细菌表达系统重组生产，带有N端GST标签，分子量为72 kDa，马达结构域涵盖第3–418位氨基酸，Uniprot编号为O95239。

应用场景

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的人源重组驱动蛋白KIF4（GST标签）（货号：CR01）主要作为微管激活型驱动蛋白ATP酶实验的底物，适用于以下研究方向：KIF4（Chromokinesin，kinesin-4）抑制剂的筛选、驱动蛋白候选药物的反筛实验，以及以微管激活ATP酶活性为读数的相关机制研究，对于需要评估化合物对驱动蛋白马达活性抑制效果的实验，本品可提供稳定，可定量的酶学基础。

产品形式与组成

产品以冻干粉形式提供，复溶后组分为80 mM PIPES pH 6.8、100 mM NaCl、2 mM MgC₂、5%（w/v）蔗糖及1%（w/v）葡聚糖。该配方有助于维持蛋白在体外的稳定性与活性。

纯度说明

产品纯度通过4–20%聚丙烯酰胺凝胶考马斯蓝染色后的扫描光密度法评估，确定纯度大于50%。每管中总蛋白量约为标示量的1.5倍。约30 kDa处的主要杂质为GST蛋白。经验证，该杂质不会抑制Chromokinesin马达的微管激活ATP酶活性，因此不影响本品在ATP酶实验中的使用。

生物活性

本品生物活性通过微管激活型ATP酶实验测定。在数据表规定条件下，KIF4表现出微管刺激的ATP酶活性。Vmax≥300 nmol ATP/分钟/mg KIF4。该活性指标可直接用于抑制剂筛选实验中的阳性对照或底物参照。

储存与复溶

冻干蛋白在

4°C、干燥剂存在（湿度<10%）条件下可稳定保存至少1年；亦可于-70°C保存至少1年。复溶时，使用蒸馏水或CMW Buffer 1（100 mM PIPES pH 7、200 mM KCl、2 mM MgCl₂、1 mM DTT、20 µM ATP）将蛋白复溶至5 mg/ml，具体复溶体积参见数据表。复溶后可分装至实验用管中，用液氮速冻。复溶后于-70°C储存可稳定至少4个月。工作浓度建议使用CMW Buffer 1稀释。

关键注意事项

驱动蛋白对反复冻融较为敏感。用于-70°C储存时，蛋白浓度不应低于5 mg/ml。已稀释至5 mg/ml以下的驱动蛋白不可再次冻存，否则将导致活性丧失。建议根据实验用量一次性分装，避免不必要的冻融循环，以确保实验结果的重复性和可靠性。

总结

本品作为人源重组KIF4马达结构域，以GST标签便于检测与纯化，具备明确的微管激活ATP酶活性，适用于驱动蛋白抑制剂筛选及反筛实验，尽管纯度大于50%且含GST杂质，但经验证该杂质不干扰目标活性，因此可作为经济高效的筛选工具用语相关药物发现研究。

文献参考

1. Hackney, D and Jiang, W. (2001) Methods in MolecularBiology (Humana Press) 164:65-71

2. Lee et al. 2001. Biochem J. 360:549-556.

3. Sekine et al. 1994. J. Cell Biol. 127:187-201.