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预成型肌动蛋白丝促销专享,纯度>99% PAFs 高重复性实验结果

0 人阅读发布时间:2026-09-15 13:42

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的预成型肌动蛋白丝(Pre-formed actin filaments,PAFs)(货号:AKF99)由纯度大于99%的兔骨骼肌肌动蛋白(Cat. AKL99)制备而成,货号AKF99。该产品以冻干粉形式提供,便于储存和运输。每批产品均经过严格的质量控制,确保在需要肌动蛋白丝底物的实验中具有高度可靠性和重现性。其平均丝长为8 µm,可在不同实验中提供一致的性能表现。

 

应用范围

体外肌球蛋白ATP酶激活的底物

肌球蛋白抑制剂C50的测定

高通量筛选(HTS)应用

肌动蛋白结合蛋白(ABPs)的体外发现与表征

 

产品优势

即用型底物: PAFs无需自行聚合,复溶后即可直接用于实验,显著节省实验准备时间,特别适合高通量筛选和需要快速启动的实验流程

高批次一致性:在肌动蛋白丝激活的肌球蛋白ATP酶试验中,PAFs可产生高度一致的结果。样本间Vmax的变异系数(CV)小于5%,不同批次间CV小于8%,确保实验数据的可靠性和可比性。

严格质控: 通过分析聚合质量和激活肌球蛋白ATP酶的能力评估生物活性。严格的质量控制确保超过85%的肌动蛋白以丝状形式存在,且肌球蛋白ATP酶活性相比单独的肌球蛋白或肌动蛋白对照组至少被刺激十倍以上。

 

纯度

PAFs由AKL99肌动蛋白蛋白制备。AKL99为纯度大于99%的α-骨骼肌肌动蛋白。纯度通过12%聚丙烯酰胺凝胶考马斯蓝染色蛋白的扫描光密度法测定,污染物主要为肌动蛋白二聚体和α-辅肌动蛋白

 

储存与复溶

冻干粉储存:

冻干蛋白在4°C、干燥条件(湿度<10%)下可稳定保存6个月。

 

复溶方法: 用2.4 ml室温Milli-Q水复溶至0.4 mg/ml浓度。复溶后缓冲液组成为:5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM CaCl₂、0.2 mM ATP、2 mM MgCl₂、5%(w/v)蔗糖。

 

储存条件:

丝状体可在4°C保存1周。

或分装为<100 µl样品,液氮速冻后储存于-70°C,可稳定保存6个月

37°C水浴快速解冻,避免超过一次冻融循环

 

稀释方法: 使用5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM ATP和2 mM MgCl₂或0.2 mM CaCl₂进行稀释。

 

生物活性检测所需试剂

1. 兔肌肉肌动蛋白预成型丝(Cat. AKF99)

2. 兔骨骼肌肌球蛋白(Cat. MY02)

3. 反应缓冲液(冰预冷15 mM Tris-HCl pH 7.5、25 mM KCl、10 mM MgCl₂、0.1 mM EGTA)

4. ATP,100 mM溶液(Cat. BSA04),取20 µl稀释至500 µl冰预冷15 mM Tris-HCl pH 7.5中,配制成4 mM溶液。

 

使用注意事项

复溶后尽快使用,避免反复冻融。

解冻时使用37°C水浴快速解冻,切勿加热或剧烈涡旋

稀释时请使用指定缓冲液,以维持丝状结构的稳定性

本产品仅用于科研用途

 

总结

预成型肌动蛋白丝AKF99以>99%的纯度、>85%的丝状体比例、8 µm的平均丝长以及优异的批次一致性,成为肌球蛋白ATP酶活性检测,肌球蛋白抑制剂筛选及肌动蛋白集合蛋白研究的理想底物。其即用型冻干粉形式和严格的质量控制体系,为高通量筛选和精准体外实验提供了可靠保障。

 

文献参考

1. Pardee J.D., and Spudich, J.A. 1982. Methods in Cell Biol.24:271-288.

2. Gordon D.J. et al. 1977. JBC, 252, 8300-8309.

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