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10 人阅读发布时间:2026-09-30 13:45
一、背景介绍
N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物 RNA 分子上最常见、丰度最高的修饰,在原核生物和病毒中也有发现。近年来,在多细胞真核生物如秀丽隐杆线虫和黑腹果蝇以及高等真核生物包括植物,小鼠和人类细胞的DNA中也鉴定出m6A修饰。m6A 在 DNA 复制、DNA 损伤、RNA 剪接、转座、转录及细胞防御等过程中发挥关键调控作用。
在人类细胞中,m6A 修饰由 METTL3/14、WTAP、RBM15/15B 和 KIAA1429 等甲基转移酶(写入器)催化,并由 FTO、ALKBH5 和 TET 样酶等依赖 α-酮戊二酸(α-KG)和 Fe²⁺ 的去甲基化酶(擦除器)移除。研究表明,m6A 甲基化酶和去甲基化酶在发育、代谢、生育等多种生物学过程中发挥重要作用,并参与癌症和病毒感染等多种疾病的发病机制。DNA/RNA 上动态可逆的 m6A 化学修饰液可能作为一种具有深远生物学意义的新型表观遗传标记。m6A修饰上调可促进病毒复制和肿瘤生长,而其下调则最早在人类癌细胞和组织中相对于正常对照被表征。
二、产品概述
由艾美捷代理Epigentek推出的Epigenase m6A 甲基化酶活性/抑制检测试剂盒(比色法)(货号:P-9019)是一套完整的优化缓冲液和试剂组合,专为利用和提取物或纯化m6A甲基化酶(如 METTL3/METTL14)检测总m6A 甲基化酶(甲基转移酶)的活性/抑制作用而设计。适用物种广泛,包括哺乳动物,植物,真菌和细菌,样本形式包括但不限于培养细胞,新鲜及冷冻组织。该试剂盒具有以下优势与特点:
快速:比色法操作步骤简便,整个流程可在4小时内完成
稳健:创新的试剂组成使背景信号极低,确保检测简单,准确,可靠且一致
便捷:细胞/组织核提取物和纯化蛋白均可使用,支持在体内和体外检测m6A甲基化酶抑制剂的抑制效果
灵敏且特异:新颖的检测原理可检测m6A甲基化酶转化的终产物,较副产物检测法更具特异性,同时实现高灵敏度,最低可检测2 µg 核提取物或 50 ng 春华酶
定量:试剂盒包含检测标准品,可对 m6A 甲基化酶比活性进行定量
灵活:条板微孔格式,适用于手动或高通量分析
三、原理与操作流程
本试剂盒用于检测总 m6A 甲基化酶活性/抑制作用。实验中,独特的 m6A 底物被稳定包被于条板孔中,活性 m6A 甲基化酶与底物结合并使其中的 m6A 发生甲基化。底物中未被去甲基化的 m6A 可被高亲和力 m6A 抗体识别,免疫信号经增强液放大。未去甲基化 m6A 的比例或量与酶活性成反比,可通过类似 ELISA 的反应进行比色定量。
四、起始材料
输入材料可为核提取物或纯化酶。每次检测所需核提取物用量为 2 µg 至 20 µg,最佳范围为 5 µg 至 10 µg。纯化 m6A RNA 甲基化酶用量为 20 ng 至 1 µg,最佳范围为 50 ng 至 500 ng,具体取决于酶的纯度和催化活性。
五、文献参考
Sun M et. al. (August 2026). METTL7A Downregulation Drives SLC1A5-Mediated Glutamine Competition to Promote Tumor Proliferation and Suppress CD8 T Cell Immunity in Gastric Cancer. Adv Sci (Weinh). :e76963. PubMed: 42544900
Sharma G et. al. (September 2025). IGF2BP3 redirects glycolytic flux to promote one-carbon metabolism and RNA methylation. Cell Rep. :116330.
Miller C et. al. (April 2025). Pathological α-synuclein dysregulates epitranscriptomic writer METTL3 to drive neuroinflammation in microglia. Cell Rep. 44(5):115618.
Li D et. al. (March 2025). MAZ-mediated N6-methyladenosine modification of ZEB1 promotes hepatocellular carcinoma progression by regulating METTL3. J Transl Med. 23(1):265.
Zhang X et. al. (November 2024). RNA m6A methylation regulatory mechanism of resveratrol in premature senescence cells. Food Sci Nutr. 12(11):9238-9251.
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