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5 人阅读发布时间:2026-09-07 14:04
产品概述
由艾美捷代理Cell Biolabs推出的Poly (ADP-Ribose) ELISA 检测试剂盒(货号:XDN-5114,96次测定)是一款采用夹心ELISA法对聚ADP-核糖(PAR)进行定量检测的试剂盒。PAR是由多个ADP-核糖集团连接而成的聚合物。作为真核细胞中重要的翻译后修饰,PAR化修饰能够调控靶蛋白的活性及其与其他蛋白的相互左右给你。该修饰由聚ADP-核糖聚合酶(PARPs)和ADP-核糖基转移酶2(ART2)催化,以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为底物;其逆反应则由聚ADP-核糖糖水解酶(PARG)和ADP-核糖基水解酶3(ARH3)介导。
PAR化修饰参与癌变、细胞分化和细胞死亡等多种重要生物学过程。该修饰的异常调控与癌症,病毒感染及神经退行性疾病等病理过程密切相关。其中研究最为深入的功能是DNA损伤诱导的PAR链生成--PAR链可招募修复蛋白和染色质重塑因子,增强DNA修复能力,这一机制亦可能成为肿瘤逃逸凋亡的途径之一。近年来,多种PARP家族抑制剂在特定癌症治疗中展现出良好前景,目前已有三种药物在欧美获批上市,主要用于BRCA突变型卵巢癌的治疗。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行PAR定量检测
1、抗PAR单克隆捕获抗体预先包被于微孔板
2、样品或PAR标准品中的PAR与捕获抗体结合
3、加入抗PAR多克隆检测抗体,与已捕获的PAR结合
4、加入HRP标记的二抗,与检测抗体结合
5、洗去未结合的酶标抗体,加入显色底物
6、发生显色反应,颜色深度与样品中PAR含量成正比
7. 于450 nm处读取吸光度值
8. 参照PAR聚合物标准曲线计算样品中PAR含量
试剂盒组分
Box 1(室温运输)
96孔蛋白结合板(Part No. 231001):96孔板
抗PAR包被抗体(Part No. 51146C):20 µL
抗PAR检测抗体(Part No. 51142C):15 µL
HRP标记二抗(1000×)(Part No. 51143C):15 µL
检测稀释液(Part No. 310804):50 mL
10×洗涤缓冲液(Part No. 310806):100 mL
底物溶液(Part No. 310807):12 mL
终止液(Part No. 310808):12 mL
100×PARP抑制剂(Part No. 51145C):3 mL,3-氨基Ben甲酰胺(3-AB),100 mg/mL(735 mM),溶于DMSO
Box 2(冰袋运输)
PAR标准品(Part No. 51144D):10 µL,2.5 µM
需自备材料
待测样品(细胞或组织裂解液)
酶标仪(可读取450 nm,可选620 nm作为参考波长)
RIPA裂解缓冲液(25 mM Tris-HCl pH 7.6,150 mM NaCl,1% NP-40,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS,蛋白酶抑制剂或混合抑制剂)
SDS(十二烷基硫酸钠)
1×PBS
储存条件
收货后,PAR标准品请于-80°C保存;抗体于-20°C保存,建议分装以避免反复冻融。其余组分于4°C保存。
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*本试剂盒仅限研究使用,不可用于诊断目的。
文献参考
1. Miwa, M. and Masutani, M. (2017). PolyADP-ribosylation and cancer. Cancer Sci. 98(10):1528-35.
2. Lüscher, B. et al. (2018). ADP-Ribosylation, a Multifaceted Posttranslational ModificationInvolved in the Control of Cell Physiology in Health and Disease. Chem Rev. 118(3):1092-1136.
3. Martin-Hernandez, K. et al. (2017). Expanding functions of ADP-ribosylation in the maintenanceof genome integrity. Semin Cell Dev Biol. 63:92-101.
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