微管蛋白紫杉醇稳定型开学大促进行中！

背景信息

微管蛋白由α-微管蛋白和β-微管蛋白两种密切相关的55kDa蛋白以异二聚体形式组成，二者分别由不同基因或小型基因家族编码，其序列在整个真核生物界高度保守。因此，从猪脑组织纯化的微管蛋白与绝大多数真核生物来源的微管蛋白具有高度同源性，可广泛用于检测来自不同物种的蛋白活性。微管蛋白聚合形成微管结构，初始聚合阶段先形成原丝，最终由13根原丝组装成直径25nm的微管，每微米微管长度约包含1650个异二聚体。微管是高度有序的纤维，具有内在极性。

产品描述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的微管蛋白（紫杉醇稳定型，冻干粉）（货号：MT002）为从猪脑组织纯化的高纯度微管蛋白（≥99%纯度，T240）制备的稳定haul微管，经紫杉醇稳定处理后以白色冻干粉末形式供应。微管平均长度为2um，呈高度均一且批次间重现性优异的状态。

应用方向

微管驱动蛋白ATPase活性检测的底物

驱动蛋白抑制剂的IC₅₀测定

适配Cyto's ELIPA™ BK060及终点法BK053 ATPase检测体系

微管相关蛋白（MAPs）的发现与表征

产品优势

无需自行制备微管，即可即用，大幅节省实验准备时间

驱动蛋白ATPase检测批内及批间变异系数（CV）≤3%

批次间活性高度稳定，实验数据重现性优异

冻干粉形式，便于长期保存和运输

纯度与生物活性

本产品所用微管蛋白纯度≥99%（T240标准）。每批产品均经过微管激活的ELIPA™无机磷酸盐ATPase检测（BK060）进行活性验证，以驱动蛋白重链（KHC）马达结构域为检测用 motor 蛋白。在标准检测条件下，KHC的微管激活ATPase活性速率为1000 nmol ATP水解/min/mg KHC，变异系数≤3%。

储存与运输

运输条件：常温运输

储存条件：冻干粉可在4°C、湿度<10%的干燥环境下保存1年

冻干粉亦可于-70°C干燥保存

复溶操作指南

以下复溶方案已针对微管激活驱动蛋白

ATPase检测进行优化。微管可按需复溶至任意目标浓度，亦可使用其他缓冲液（须含紫杉醇）。若复溶后需分装冻存长期保存，建议复溶浓度不低于5mg/mL（1mg/mL亦可冻存但保质期较短）。若计划使用非推荐缓冲液，建议联系技术支持确认兼容性。

操作步骤：

1. 将适量PM缓冲液（15mM PIPES pH 7.0，1mM MgCl₂）回温至室温，用于将微管复溶至1mg/mL

2. 制备2mM紫杉醇储备液（货号TXD01）：用无水DMSO配制，每10mL室温PM缓冲液加入100µL储备液，即得微管复溶缓冲液。注意：PM缓冲液必须处于室温，紫杉醇在低温缓冲液中会析出沉淀

3. 向冻干微管中加入复溶缓冲液至终浓度1mg/mL，轻轻混匀

4. 室温静置10-15分钟，期间偶尔轻轻混匀

5. 复溶完成后即可使用，微管平均长度为2µm

6. 复溶后微管在室温下可稳定保存2-3天，但随时间延长平均长度分布会发生变化

7. 未用完的微管可分装后用液氮速冻，于-70°C可保存3个月

*本产品仅供研究使用，不可用于诊断目的。

文献参考

1. Amos, LA. & Klug A. 1974. J. Cell Sci. 14: 523-530.

2. Funk, C.J. et al. 2004. Development of High ThroughputScreens for Discovery of Kinesin ATPase modulators.Analytical Biochemistry. 329: 68-76.